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【技術文章下載】活性氧分子檢測有新方法了,您知道嗎?-Molecular Devices
活性氧分子檢測有新方法了,您知道嗎? | |||
*,氧氣是生命運動過程中*的一種氣體,而細胞使用氧氣時會產生副產品,以高能氧氣分子形式存在的廢棄物質即為自由基。自由基會對人體組織和細胞結構造成損害,我們把這種損害稱為氧化應激,人體在利用氧氣過程中會加重自身的壓力。活性氧(ROS)是含有氧的化學活性分子,ROS是需氧細胞在代謝過程中產生的一系列活性氧簇(ReactiveOxygenSpecie),包括:O2·-、H2O2及HO2-·以及-OH等。 目前研究發現ROS可雙向調控某些腫瘤細胞的凋亡和增殖,并發現了自由基與細胞信號轉導之間的內在關聯。例如DNA損傷,以前的研究表明癌細胞要比正常的細胞積累著更多的ROS,而且癌細胞中水平增高的ROS一直被認為一件不好的事情,促進細胞中DNA損傷、遺傳不穩定性和藥物抗性。 目前細胞內ROS含量水平通常采用化學發光法、紫外-可見吸收分光光度法、熒光光度法、電子自旋探針以及選擇性電極法等。目前較為普通的方式是熒光探針標記方法,檢測是基于由偶氮二異丁脒鹽酸鹽(2,2’-azobis-2-methyl-propanimidamidedihydrochloride,AAPH)熱解產生的過氧自由基,在氧自由基吸收物質存在的條件下與熒光素反應,從而影響熒光信號強度。氧自由基吸收物質的能力越強,清除的過氧自由基也就越多,熒光信號持續的時間也就越長。與化學發光一樣,熒光探針法同樣也是靈敏度高的一種檢測方法。由于綠色熒光檢測和成像易受細胞自發熒光的影響,因此遠/近紅外染料常被用來檢測ROS含量從而避免細胞自發熒光的干擾。
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