一文讀懂酶標(biāo)儀的工作原理
1、根據(jù)比耳(Beer)定律:當(dāng)一束平行單色光通過溶液時,由于溶液吸收光能量會導(dǎo)致光強(qiáng)度降低。并且某一單色光束通過溶液時,吸光度與被測溶液的濃度成線性關(guān)系,這就是分光光度分析定量的理論根據(jù)。測定某一液的濃度的變化可以通過測定其吸光度的變化來實(shí)現(xiàn)。也就是說測定溶液的吸光度,就可以得到其相應(yīng)溶液濃度的數(shù)值,這就是分光光度計的基本原理,通過分光光度計可以進(jìn)行溶液的比色分析。
2、比耳定律只有在入射光是單色光的前提下才能成立。單色光是一個理論概念實(shí)際中使用濾光片來使入射光線接近理論上的單色光。高級的分光光度計或酶標(biāo)儀具備有多個波長段的濾光片可供選擇,而且濾光片的性能是非常良好的,以提高儀器的分辨率,減少散光。
3、酶標(biāo)儀是由一個分光光度計和微處理機(jī)構(gòu)成的,因而它也叫酶標(biāo)判讀儀或酶標(biāo)分光光度計。因而它的光學(xué)原理跟分光光度計的原理是相同的。它主要是用于測定酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)的微量反應(yīng)板上各孔的光吸收值。通過測量各微孔的光吸收值來測定出各孔中溶液的濃度,而濃度的數(shù)值則可說明這個試驗(yàn)反應(yīng)中抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)情況。
4、由于聯(lián)用了微處理機(jī)不但能完成光譜數(shù)據(jù)的測定和計算,而且提高了儀器的自動化程度。例如自動調(diào)零、自動篩選和設(shè)置參數(shù)、設(shè)置上下限、自動記錄和自動打印等。酶標(biāo)儀測定的原理是在特定波長下檢測被測物的吸光值。