熒光酶標(biāo)儀使用時(shí)候要注意哪些方面呢?
熒光酶標(biāo)儀一般是由光學(xué)系統(tǒng)、單色器系統(tǒng)、樣品室、探測(cè)器和檢測(cè)系統(tǒng)構(gòu)成,簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō),光源發(fā)射的光束通過(guò)單色器系統(tǒng)處理后穿過(guò)整個(gè)樣品,部分的未被樣品吸收的光抵達(dá)光電檢測(cè)器當(dāng)中,經(jīng)過(guò)信號(hào)處理后,反饋在儀器顯示屏上。
基本原理是將抗原或抗體與酶用膠聯(lián)劑結(jié)合為酶標(biāo)抗原或抗體,此酶標(biāo)抗原或抗體可與固相載體上或組織內(nèi)相應(yīng)抗原或抗體發(fā)生特異反應(yīng),并牢固地結(jié)合形成仍保持活性的免疫復(fù)合物。
熒光酶標(biāo)儀測(cè)定是在特定波長(zhǎng)下,檢測(cè)被測(cè)物的吸光值。隨著檢測(cè)方式的發(fā)展,擁有多種檢測(cè)模式的熒光酶標(biāo)儀叫做多功能酶標(biāo)儀,可檢測(cè)吸光度(Abs)、熒光強(qiáng)度(FI)、時(shí)間分辨熒光(TRF)、熒光偏振(FP)、和化學(xué)發(fā)光(Lum)。
熒光酶標(biāo)儀的核心是由全光譜光學(xué)分光系統(tǒng)和9通道光學(xué)快速測(cè)量模塊組成。準(zhǔn)確率高,技術(shù)先進(jìn),操作簡(jiǎn)單,分析精確,儀器使用覆蓋面廣。廣泛適用于科研單位,食品安全檢測(cè)領(lǐng)域,高等教育學(xué)院實(shí)驗(yàn)室,醫(yī)療檢驗(yàn),農(nóng)業(yè)畜牧系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室。該儀器的檢測(cè)速度是指其完成比色測(cè)定所需要的時(shí)間,在快速讀取模式下,整板讀取僅需10秒。檢測(cè)速度快,有利于提高檢測(cè)的精密度,可有效避免由于測(cè)定過(guò)程中,因測(cè)定時(shí)間不同所致的各微孔間吸光度間的差異。
在使用熒光酶標(biāo)儀的時(shí)候,我們應(yīng)該注意這些方面:
一、外觀
酶標(biāo)儀上應(yīng)有儀器名稱,型號(hào),編號(hào),生產(chǎn)廠家,出廠日期和電源電壓;各調(diào)節(jié)旋鈕,按鍵和開關(guān)均能正常工作,外表面無(wú)明顯機(jī)械損傷;顯示文字應(yīng)清楚完整。
二、酶標(biāo)儀的穩(wěn)定性漂移、
選用492nm波長(zhǎng),在吸光度o.0A處,測(cè)量標(biāo)稱值為1.0A的光譜中性濾光片測(cè)量操作按儀器說(shuō)明進(jìn)行、,記錄儀器示值或均值,10min后再次記錄儀器示值或均值,前后兩次測(cè)量值之差不應(yīng)超過(guò)±0.00。
三、吸光度測(cè)量的準(zhǔn)確度
選用405,492和620nm波長(zhǎng),以空氣為參比,分別測(cè)量標(biāo)稱值為0.5和1.0A的光譜中性玻璃濾光片,用測(cè)試板代替酶標(biāo)板,按儀器說(shuō)明連續(xù)測(cè)量3次,按下式計(jì)算準(zhǔn)確度:AA=1/3A、+A。+A3、—A:A:為標(biāo)準(zhǔn)值。