使用全波長酶標儀要注意以下幾個方面
全波長酶標儀是電磁波,波長100nm——400nm稱為紫外光,400nm——780nm之間的光可被人眼觀察到,大于780nm稱為紅外光。綠色植物之所以是綠色,是因為植物吸收的大部分為紅橙光和藍紫光,但對綠色不吸收,反射出來,呈現為綠色。全波長酶標儀測定的原理是在特定波長下,檢測被測物的吸光值。微孔板是一種經事先包理于放置待測樣本的透明塑料板,板上有多排大小均勻一致的小孔,孔內都包埋著相應的抗原或抗體,微孔板上每個小孔可盛放零點幾毫升的溶液。在使用全波長酶標儀的時候,我們應該注意這些方面:
一、外觀
全波長酶標儀上應有儀器名稱,型號,編號,生產廠家,出廠日期和電源電壓;各調節旋鈕,按鍵和開關均能正常工作,外表面無明顯機械損傷;顯示文字應清楚完整。
二、全波長酶標儀的穩定性漂移、
選用492nm波長,在吸光度o.0A處,測量標稱值為1.0A的光譜中性濾光片測量操作按儀器說明進行、,記錄儀器示值或均值,10min后再次記錄儀器示值或均值,前后兩次測量值之差不應超過±0.00。
三、吸光度測量的準確度
選用405,492和620nm波長,以空氣為參比,分別測量標稱值為0.5和1.0A的光譜中性玻璃濾光片,用測試板代替酶標板,按儀器說明連續測量3次,按下式計算準確度:AA=1/3A、+A。+A3、—A:A:為標準值、。
四、吸光度測量的重復性
波長選用同3、,在酶標板排加注空白溶液,第二排加入濃度為200rig/ml的重鉻酸鉀溶液,重復測量5次。記錄每次測量的第二排吸光度值,取第二排任一孔吸光度值與各次對應孔吸光度值。
(五)全波長酶標儀的線性
選用540nm波長,將標稱值o.5,1.0A中性濾光片分別放入測試板樣本位置中,以空氣為參比,各重復測量3次;然后將以上兩片中性濾光片疊加后置于測試板的同一孔位中,重復測量3次。
六、測量速度的檢定
選用492nm波長,放人96孔酶標板進行測量,用秒表計測儀器打印出全部數據的時間。
全波長酶標儀除了在選購時,應盡可能自檢外,在用于中也應定期檢定,以保證全波長酶標儀測量的有效性。