衍生化技術(shù)就是通過化學(xué)反應(yīng)將樣品中難于分析檢測的目標(biāo)化合物定量的轉(zhuǎn)化成另一易于分析檢測的化合物，通過后者的分析檢測可以對目標(biāo)化合物進(jìn)行定性和(或)定量分析。該技術(shù)在色譜分析中得到廣泛應(yīng)用。按衍生化反應(yīng)發(fā)生在色譜分離之前還是之后進(jìn)行，可將衍生化分為柱前衍生化和柱后衍生化。
柱前衍生化的目的
柱前衍生化就是在色譜分離之前將樣品與一定的化學(xué)試劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，將樣品中的目標(biāo)化合物制備成適當(dāng)?shù)难苌铮缓笤儆蒙V進(jìn)行分離檢測。
衍生化實(shí)驗(yàn)分類？什么是衍生化？
①將一些不適合某種色譜技術(shù)分析的化合物轉(zhuǎn)化成可以用該種色譜技術(shù)分析的衍生物。如某些高沸點(diǎn)、不汽化或熱不穩(wěn)定的化合物不能用氣相色譜分析，通過衍生化轉(zhuǎn)化成可以汽化的或熱穩(wěn)定的衍生物，然后再用氣相色譜分析。
②提高檢測的靈敏度(降低檢測限)，如液相色譜的紫外檢測器靈敏度很高，但很多化合物沒有紫外吸收或紫外吸收很弱，可以通過衍生化反應(yīng)給這些化合物接上一個(gè)有強(qiáng)紫外吸收的基團(tuán)，提高了這些化合物的檢測靈敏度。又如氣相色譜的電子捕獲檢測器(ECD)對含鹵素的化合物有很高的靈敏度，可以通過衍生化反應(yīng)將一些化合物接上鹵素基團(tuán)，提高這些化合物的檢出靈敏度。
③改變化合物的色譜性能，改善分離度。如一些異構(gòu)體在色譜上很難分離，通過衍生化反應(yīng)，使兩個(gè)異構(gòu)體生成的衍生物色譜性能產(chǎn)生較大差異而得到分離。對一些難分離的物質(zhì)對也可以選用某些衍生化試劑，只使其中一個(gè)發(fā)生衍生化反應(yīng)轉(zhuǎn)化成衍生物，兩者可得到分離。
④利用衍生化反應(yīng)可以幫助化合物結(jié)構(gòu)的鑒定，這點(diǎn)在使用色譜& 質(zhì)譜，色譜& 紅外光譜和色譜& 核磁共振波譜聯(lián)用方法確定化合物結(jié)構(gòu)時(shí)作用更加明顯。
不同模式的色譜柱前衍生化的目的有不同的側(cè)重，氣相色譜中柱前衍生化主要是改善目標(biāo)化合物的揮發(fā)性;而液相色譜和薄層色譜中柱前衍生化的主要目的是改善檢測能力。所以不同模式的色譜柱前衍生化的方法和所有的衍生化試劑也略有不同。 2. 柱前衍生化的條件
色譜中柱前衍生化使用的衍生化反應(yīng)應(yīng)滿足以下幾個(gè)條件：
①反應(yīng)能迅速、定量的進(jìn)行，反應(yīng)重復(fù)性好，反應(yīng)條件不苛刻，容易操作。
②反應(yīng)的選擇性高，最好只與目標(biāo)化合物反應(yīng)，即反應(yīng)要有專一性。
③衍生化反應(yīng)產(chǎn)物只有一種，反應(yīng)的副產(chǎn)物和過量的衍生化試劑應(yīng)不干擾目標(biāo)化合物的分離與檢測。
④衍生化試劑應(yīng)方便易得，通用性好。
總之，柱前衍生化可以擴(kuò)大色譜分析的應(yīng)用范圍，使色譜分析的結(jié)果能更令人滿意，所以柱前衍生化是色譜樣品處理的一個(gè)重要方法。在衍生化反應(yīng)中，并非所有的衍生化試劑都要反應(yīng)掉，通常我們加入的衍生化試劑的量要過量， 有時(shí)甚至加入的量很大，而真正參加反應(yīng)的則很少，只要衍生化產(chǎn)物的出峰時(shí)間不與其他的峰重合就可以
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