凍精解凍杯
大部分鄉村都推行了牛的冷凍精液配種新技術(簡稱冷配)。但有的進行冷配后,牛的配種準胎率不高。這是啥原因呢?據筆者調查分析,這項工作一般都是由農村畜牧技術員擔任,他們在給母牛輸精的過程中問題并不大,問題主要出在了在冷凍精液和解凍方法掌握不準確上。冷凍的期間以及長期的儲存中出現細胞的損害。大多數的損害出現在冷凍和解凍的過程中。冷凍過程中出現損害的主要原因是冰晶體形成和細胞脫水,破壞細胞壁(膜)和胞內細胞器。精子形態,質量和活力在解凍后明顯降低,而且冷凍增加了精子DNA的損害。進一步的損害由樣品被微生物和高水平的超氧化物自由基污染引起,為了降低冰晶體形成和細胞脫水,在冷凍之前增加了一個冷凍保存方案。
各種冷凍保存解決方案在商業上是可行的,其中絕大多數都含有不同比例的甘油和白蛋白。冷凍之后樣品沉浸在液態氮中。一些技術已經開發出來,試圖減少凍融造成的損害,其中包括凍結法,樣品在投入液態氮之前固定在氣相10分鐘,緩慢或多步驟的方法,樣品在逐漸冷卻的氣相中大約40待分鐘,使用一個可編程的程序降溫儀,預設冷卻率為1 - 10°C / min。
現將冷凍精液解凍的具體操作方法介紹如下,供大家參考。
解凍方法:凍精使用前必須預復溫解凍,而解凍后精子復蘇率高低,關鍵取決于解凍溫度;傳統解凍法:,即快取、快投、快融解。先將解凍液注入滅菌的小玻璃管中,然后用40℃~45℃溫水加溫,待解凍液溫度達到40℃時,打開液氮罐,馬上用長把鑷子向外提取凍精顆粒,并立即投入已加溫的解凍液中,邊溶化邊搖晃試管5~10秒,待凍精顆粒溶化到小米粒大時,迅速將試管取出水面,再繼續搖晃到全部溶化。
現代采用凍精解凍杯進行解凍:使用注意事項:1.一定要先向杯子內加水,然后才能通電2.加水量應該高于傳感器的高度。
如果待顆粒溶化完再將試管取出水面,精子則迅速死亡。 精液解凍后立即輸精,不宜保存太久,一般不得超過2小時。否則,精子活力顯著降低而影響受胎率。為做到解凍后快輸精,待母牛保定好后再進行解凍。
方法的可行性取決于實驗室的資源,使用凍結技術,應該測試公牛的精子和解凍后檢查,并應定期進行質量控制計劃。