磁珠分選細胞標記及分選策略

• 磁珠分選原理

磁珠分選是基于細胞表面抗原能與偶聯抗體的磁珠性結合，從而使細胞被標記。標記好的細胞過柱子（柱子周圍連磁鐵）時，帶磁珠的細胞留在柱子上，不帶磁珠的細胞流走了，從而實現目的細胞的分選。

二、細胞標記方式

利用磁珠分選細胞的關鍵點是細胞標記。標記方式有兩種，包括直接標記和間接標記。

1、  直接標記

直接標記是標記目的細胞，是較、較的磁性標記方法。目前有多種分選人、小鼠、大鼠以及非人類靈長類細胞的MACS直標微珠可供選用。

2、  間接標記

間接標記是標記非目的細胞，需要聯合使用單克隆或多克隆抗體和微珠。未結合抗體、生物、化抗體或熒光素標記抗體均可作為一抗標記細胞，再使用抗球蛋白微珠、抗或鏈霉親和素微珠、抗熒光素微珠等作為二抗磁性標記細胞。

三、磁珠分選策略

根據細胞標記方式可以選擇不同的磁珠分選策略。

1陽性分選

陽性分選是目的細胞被磁性標記，并直接分選出來，標記的細胞可富集10000倍。分選后的細胞不必微珠，可立即培養或后續操作，其特點是，回收率高，操作迅速，操作簡便。

2陰性分選

陰性分選又叫分選，磁性標記非目的細胞，從而將非目的細胞從細胞混合物中。其適用范圍包括以下幾個方面：

① 不需要細胞；

② 缺乏針對目的細胞的性抗體（如細胞）；

③ 不需要抗體和目的細胞結合，如T細胞、B細胞、NK細胞功能分析；

④ 需要進一步通過陽性選擇分選細胞亞群。

3復合分選

復合分選其實是陰性分選和陽性分選的結合。如先陰性分選，非目的細胞，然后再陽性分選，獲取目的細胞。這種分選策略的適用范圍包括：

①非目的細胞也表達用來陽性分選目的細胞的抗原；

② 要分選、珍貴細胞，先非目的細胞再陽性分選，可獲得度目的細胞。

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