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體積排阻色譜知多少？
體積排阻色譜（ size-exclusion chromatography，SEC）是快速分離不同分子量混合物的色譜方法，可以快速的確定樣品混合物的復(fù)雜性，而且可以同時(shí)給出各個(gè)組分的大概分子量及分布。
分離原理：分子的體積排阻，樣品組分和固定相之間原則上不存在相互作用，色譜柱的固定相是具有不同孔徑的多孔凝膠，只讓臨界直徑小于凝膠孔開(kāi)度的分子進(jìn)入（保留），其孔徑大于溶劑分子，所以溶劑分子可以自由地出入。高聚物分子在溶液中呈無(wú)規(guī)則線團(tuán)，線團(tuán)的體積和分子量有一定的線性關(guān)系，對(duì)不同大小的溶質(zhì)分子可以滲透到不同大小的凝膠孔內(nèi)不同的深度，小的溶質(zhì)分子，大孔小孔都可以進(jìn)去，甚至可以滲透到很深的孔中。因此小的溶質(zhì)分子保留時(shí)間長(zhǎng)，洗脫體積大，而大的溶質(zhì)分子保留時(shí)間短，洗脫體積小。
GPC色譜柱選擇
按照樣品所溶解的溶劑來(lái)選擇柱子所屬系列：
THF，DMF，三氯jia烷。
按照樣品分子量范圍來(lái)選擇色譜柱：
樣品分子量應(yīng)處在排阻極限和滲透極限的范圍內(nèi)，并且最好是處在校正曲線線性范圍內(nèi)。
SEC中流動(dòng)相僅起到在柱子中
運(yùn)輸溶質(zhì)的作用
流動(dòng)相選擇：
能*溶解樣品，但不與試樣反應(yīng)，不與填料有任何相互作用，黏度低，沸點(diǎn)比柱溫高20-50℃。
典型的流動(dòng)相：
100mmol磷酸鉀和氯hua鉀溶液。