您好, 歡迎來到化工儀器網
9
嬰幼兒食品和乳品中乳清蛋白的測定
乳清蛋白是采用先進工藝從牛奶中分離提取出來的珍貴蛋白質，以其具有高生物價、高消化率、高蛋白質功效比和高利用率等優點，被譽為“蛋白zhi王"，是*的人體優質蛋白質補充劑之一。其含量的高低決定了嬰幼兒奶粉的品質，相關國標通過酸水解以后的氨基酸來評價乳清蛋白的含量，月旭科技推出的檢測方法檢測更加快捷可靠。
樣品前處理
稱取0.1g試樣（含蛋白質7.5mg-25mg的樣品），于水解管中，在冰水浴中冷卻 30min后加入2mL已經冷卻的過甲酸溶液，蓋好瓶塞后置于0℃±1℃冰箱中，冰浴16h。向各水解管中加入0.3mL氫溴酸，振搖后冰浴 30min，在60℃±2℃氮吹儀上濃縮至干。向水解管內加入6moL/L鹽酸10mL，沖入氮氣1min 后，擰緊螺絲蓋，將水解管放在110℃±1℃的恒溫干燥箱內水解24h后取出冷卻至室溫。將水解液用超純水轉移并定容至25mL容量瓶中，混勻，濾紙過濾。吸取濾液1mL于60℃±2℃氮吹儀上濃縮至干，殘留物用1mL超純水溶解，待衍生。
標準品溶液
用超純水配置磺基丙氨酸、天冬氨酸、丙氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸標準品溶液1μmoL/mL，待衍生。
衍生方法
分別將月旭科技氨基酸衍生方法包中 A、B兩種衍生試劑用稀釋劑稀釋至原來濃度的 1/5；精密量取混標溶液及樣品溶液各160μL，加入稀釋后的衍生溶液 A、B 各100μL，混勻，室溫反應60min；然后加入正己烷溶液 400μL，旋緊蓋子后振搖10s，室溫靜置分層，取下層液200μL，加入800μL水中，混勻；再移取200μL加入到800μL水中，混勻，用0.45μm 有機濾膜過濾，即得。
色譜條件
色譜柱：月旭Ultimate® AQ-C18（4.6×250mm，3μm）。
柱溫：40℃；
紫外檢測器：254nm；
流速：1.0mL/min；
進樣量：5μL。
譜圖和數據
1. 磺基丙氨酸、天冬氨酸、丙氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸標準品溶液1μmoL/mL。
2. 樣品水解
結論
用月旭Ultimate® AQ-C18（4.6×250mm，3μm）色譜柱，在該色譜條件下測定，能滿足實驗需求。