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肝素親和層析簡介

閱讀：3705 發布時間：2021/12/16

乳鐵蛋白是哺乳動物乳汁中富含的一種非血紅素鐵結合糖蛋白，且具有強大的生物功能，如抗菌、抗氧化、抗癌、促進腸道發育和鐵吸收以及調節免疫系統等。因乳鐵蛋白具有優質的生物功能，免疫力低下的人群、患有感染性疾病的人群、具有骨質疏松風險的人群，以及缺鐵性貧血人群均對于乳鐵蛋白的補充有所需求。

肝素(Heparin)是一種含硫酸酯的酸性多糖，可通過糖苷鍵與一些結構糖蛋白結合，同時肝素表面的負電荷會與帶正電的蛋白質發生離子作用。因此，肝素能和抗凝血因子III、凝血酶、類凝血酶、重組人角質細胞生長因子等生物大分子結合。在合適的緩沖液條件下，乳鐵蛋白與肝素可通過糖苷鍵和離子發生親和作用，故肝素也可用于純化乳及乳制品中的乳鐵蛋白。

月旭科技Heparin Tanrose 6FF/Heparin Tanrose 6HP肝素親和介質

Heparin Tanrose 6FF/Heparin Tanrose 6HP介質是以瓊脂糖為基架，肝素為配基的親和介質，具有物理及化學穩定性不易脫落、使用壽命長、應用范圍廣泛的特點。

技術參數

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樣品純化過程

1	將Heparin Tanrose 6FF/Heparin Tanrose HP裝入合適的層析柱，層析用5倍柱體積的結合液進行平衡，使填料處于與目的蛋白相同的緩沖體系下，起到保護蛋白的作用。
2	將樣品加到平衡好的Heparin Tanrose 6FF/Heparin Tanrose HP中（保證目的蛋白與Heparin Tanrose 6FF/Heparin Tanrose HP充分接觸，提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
3	用10-15倍柱體積的洗雜液進行清洗，去除非特異性吸附的雜蛋白，收集洗雜液。
4	使用5-10倍柱體積的洗脫液，收集洗脫液，即目的蛋白組分。
5	依次使用3倍柱體積的結合液和5倍柱體積的去離子水平衡填料，最后再用5倍柱體積的20%的乙醇平衡，然后保存在等體積的20%的乙醇中，置于4度保存，防止填料被細菌污染。