液相維護小貼士:紫外檢測器篇
小伙伴們大家好,之前我們討論了泵和進樣器的維護之后,今天我們來聊聊檢測器。
有人說Chemistry代表Chem is try很有意思。化學的美妙在于它的無限可能性。中學化學老師曾經說過“結構決定性質,性質決定用途。"擴展到我們的分析工作中,也決定了分析手段,所有的分析都有規律可循,緣分“結構"注定!
在色譜實驗室中紫外檢測器是bi備的,70%以上的物質都可以用紫外檢測器來分析,今天我們就扒一扒紫外可見檢測器。
一、紫外檢測器的原理
紫外-可見光檢測器(UV-Vis Detector, UVD)是應用*泛的檢測器,遵循的原理是朗勃比爾定律。
吸光度(A)=摩爾吸光度(ε)×光程(b)×濃度(c)。
吸光度定義為透射率的負對數,它是透射光與入射光的強度之比。
吸光度(A)= lg(1/透射率(T))。
紫外檢測器的靈敏度與溶劑的影響、背景吸收、示差折光效應有關,不同種類溶劑有其截止波長,溶劑的質量好壞對其截止波長有影響,溶劑質量與含紫外吸收的雜質、溶解在其中的氧氣、緩沖液溶質的紫外吸收等因素有關;背景吸收減少線性范圍、許多溶劑會產生背景吸收。
紫外可見檢測器還有個Plus的兄弟——二極管陣列檢測器。
光電二極管矩陣檢測器簡稱PDA(Photo-Diode Array),有的品牌也稱為DAD(Diode Array Detector),一般來說,紫外檢測器比DAD的靈敏度高約1倍。但DAD也有它的優勢,一是可以對未知物進行波長掃描確定最佳吸收波長,二是可以同時檢測多個波長,三是可以進行峰純度的檢査。
紫外檢測器與DAD的區別為:紫外檢測器是光源發出的光先分光,讓特定波長的光通過狹縫,這樣光的強度可以調節,然后通過流通池,光束被流通池里的樣品吸收,未吸收的光達到光電二極管,產生電流變化,DAD光源發出的光不分光,讓全波段波長的光通過狹縫,然后通過流通池,光束被流通池里的樣品吸收,未吸收光被分光,各種波長的光落在不同位置的二極管上,各二極管產生電流變化。因為是后分光,所以DAD不同波長處光強度并不一致,波長分辨率也不及單波長的紫外檢測器,需要通過其他手段來提高某些波長的靈敏度。
二、紫外檢測器的優缺點
三、紫外檢測器的維護
紫外檢測器出問題,通常是氘燈、流通池、光路問題,我們可自行解決的是換氘燈、清洗流通池。
以月旭科技Wisys5000 HPLC為例更換氘燈:
注意:
1、在開始下面描述的程序之前,拔下電源插頭斷開本單元的電源。只有在將上蓋安裝回其位置之后,該單元才可以重新連接到電源。
2、 紫外線對眼睛有害!斷開設備電源!用螺絲刀 Torx T10 擰下燈罩蓋。
切勿用裸手觸摸石英燈泡,因為在后來打開燈時指紋會不可避免地損壞燈。燈的位置在設備中精確確定,不需要進一步調整。燈更換后的組裝步驟與拆卸相同,只是按相反的順序。打開本機并點亮燈,如果沒有發生錯誤,請關閉燈,然后進行新燈泡的校準。
更換鎢燈的步驟近似,感興趣的小伙伴可以單聊。
以Wisys5000為例清洗流通池窗片/更換流通池窗片
污染的流通池會降低光的傳輸,增加噪聲,很難使信號歸零。zui簡單的清洗方法是用合適的溶劑沖洗拆除的流通池。清洗前必須從儀器取出流通池。根據污染物的特性選擇互溶性系列的溶劑。它可以使用有機和無機溶劑和稀釋酸溶液(如用1:10 到 1:20的稀硫酸或硝酸溶液)。此操作完成后用純溶劑沖洗流通池。連接流通池到系統,當有液體流過時,觀察是否泄漏。
如果有必要更換有裂紋或受污染的窗片,或改變制備流通池的光學路徑,擰下螺釘,拆下流通池蓋并取出窗片和密封件。使用干燥的注射器往里推空氣可以更好的移除密封的流通池窗片,不要用手觸摸窗片。指紋會阻擋紫外線輻射的通道,并有可能損壞的窗片表面。將干凈的窗片插入到流通池中,以便在流通池中調整所需的光路。檢查墊片的完好情況 和密封件的密封面是否有窗片碎片或任何其他雜質。損壞的密封件須更換。
今天的話題就扒到這里了,下期見。