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去內毒素親和填料常見問題解答
去內毒素親和填料常見問題解答
內毒素是一種常見的蛋白污染物，它的存在使得蛋白的活性研究變得十分復雜，并且內毒素是一種對人類有害的化學物質，它能引起發熱、微循環障礙、內毒素休克及播散性血管內凝血等一系列不良癥狀，因此，檢測和去除蛋白中的內毒素有著十分重要的意義。
月旭Endotoxin rem Tanrose 4FF 內毒素親和填料以自制的瓊脂糖凝膠為基質、多占菌素B為配基，用于去除生物源蛋白類產品（包括多肽、抗體、多糖等）中的內毒素，但多占菌素B只對部分內毒素有抑制作用，而不能抑制所有內毒素。
1. 內毒素去除效率低，應當怎么做？
①可能原因：樣品pH值不在內毒素結合范圍。
解決方法：用0.1M NaOH或0.1M HCl調節pH至7-8。
②可能原因：樣品與填料接觸時間短。
解決方法：降低流速，增加樣品接觸時間。
③可能原因：檢測系統被內毒素污染。
解決方法：確保所有試驗用品均為無熱源產品。
④可能原因：內毒素與目的蛋白結合較強。
解決方法：優化樣品pH，使樣品能夠與內毒素分離。
2. 樣品被污染，應當怎么做？
可能原因：該填料純化過其他樣品。
解決方法：增加接觸時間；不要用使用過的填料來去除不同樣品的內毒素。
3.樣品回收率低，應當怎么做？
①可能原因：樣品非特異性吸附在填料上。
解決方法：增加樣品和平衡液中的NaCl濃度。
②可能原因：目的蛋白與內毒素結合一起被去除。
解決方法：優化樣品pH，使樣品與內毒素分離。
