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親和層析之蛋白A
球菌的細胞壁，與IgG的Fc片段具有非常強的特異性，分子量約為42×103，如圖所示。一般在蛋白 A親和層析中，配基在中性pH條件下結(jié)合抗體，在酸性pH條件下與蛋白解離。
蛋白A與抗體IgG的Fc片段結(jié)合模式
基于蛋白 A 親和層析的抗體捕獲工藝較為穩(wěn)定，但也存在一些不足，主要包括：
（1）介質(zhì)成本高。
（2）配基易脫落。
（3）洗脫條件苛刻。
（4）Protein A介質(zhì)的再生比較困難。
針對以上問題，部分商業(yè)化蛋白A親和層析介質(zhì)中使用的基本為改造的蛋白A配基，改善了天然蛋白A的缺點，提高了耐堿能力和洗脫 pH。月旭科技推出的耐堿抗體親和介質(zhì)-耐堿Protein A Solid/耐堿Protein A 4FF， 由大腸桿菌表達，經(jīng)層析純化獲得，純化過程不適用抗體柱親和層析，避免了產(chǎn)品中摻入無關(guān)IgG的可能，改配基pH耐受0.5M NaOH和0.5M HCl處理，不降解，抗體結(jié)合能力不變。該介質(zhì)適合從大批培養(yǎng)液捕獲單克隆抗體或Fc融合蛋白，也適合與從腹水或者血漿中捕獲多克隆抗體。
技術(shù)參數(shù)
應(yīng)用實例
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