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貨物所在地:上海上海市
更新時間:2024-10-30 21:00:07
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伴刀豆蛋白A(ConA)磁珠將高質(zhì)量的伴刀豆球蛋白共價偶聯(lián)在超順磁性納米微球表面, 可用于從血清和細胞提取物中分離糖蛋白。與當前國際市場上同類產(chǎn)品相比,其具有更大的特異性表面區(qū)域及更多的表面蛋白結(jié)合位點,非特異性結(jié)合低,使用起來簡便高效。并可以借助磁力架等磁分離設(shè)備非常便捷地應(yīng)用于相關(guān)實驗。
產(chǎn)品優(yōu)勢
1.具有高效的蛋白結(jié)合能力。
2.超低非特異性吸附的性能。
3.配合磁力架操作省時、簡便、溫和。
4.產(chǎn)品穩(wěn)定性高。
訂購信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 價格 |
伴刀豆蛋白A(ConA)磁珠 | AP62L222 | 1 mL | 400 |
常溫運輸。4℃保存,有效期 24 個月。
粒徑 | -1um |
濃度 | 10 mg/mL |
使用范圍 | 分離糖蛋白,CUT&RUN |
自備試劑
緩沖液 | 配方 |
結(jié)合緩沖液 | 1×PBS, 1mM MgCl2, 1mM MnCl2, 1mM CaCl2 (pH7.4) |
洗滌緩沖液 | 1×PBS, 1mM MgCl2, 1mM MnCl2, 1mM CaCl2 (pH7.4), 0.1% Tween 20 |
洗脫緩沖液 | 5mM Tris(pH 8.0), 0.15M NaCl, 0.05% SDS,1M Glucose |
樣本處理
1.準備哺乳動物細胞(1.0×104~1.0×105 個),離心收集(4℃,600×g,3~5min),小心吸棄上清;
2.加入 90μL 結(jié)合緩沖液 ,充分混勻重懸細胞,離心收集(4℃,600×g,3~5min),小心吸棄上清;
3.加入 90 μL 洗脫緩沖液 ,同時加入蛋白酶抑制劑,充分混勻重懸細胞。
磁珠預(yù)處理
4.用移液器輕柔吹打 伴刀豆球蛋白 A 磁珠 ,使其充分混懸,取 10µL 磁珠懸液置于新的 1.5mL 離心管中,接著在磁力架上靜置 1 min,待磁珠吸附到離心管側(cè)壁上后,吸棄上清;
5.加入 200μL 結(jié)合緩沖液 ,用移液器輕柔吹打重懸磁珠,接著在磁力架上靜置 1min,待磁珠吸附到離心管側(cè)壁上后,吸棄上清;
6.重復(fù)上個步驟 2 一次;
【注】:面對多個樣品時,可先將總共所需的磁珠預(yù)處理后再分裝到各個反應(yīng)管中。
樣品的結(jié)合
1.在預(yù)處理后的磁珠中加入步驟 3 處理后的細胞樣本,置于翻轉(zhuǎn)混合儀上孵育(常溫 30 min),接著在磁力架上靜置 1min,待磁珠吸附到離心管側(cè)壁上后,小心吸棄上清,離心管中剩余的即為蛋白-磁珠復(fù)合物;
洗滌
2.在步驟 7 得到的 蛋白-磁珠復(fù)合物中加入 500 μL 漂洗緩沖液,用移液器輕柔吹打磁珠,使其充分混懸,接著在磁力架上靜置 1min,待磁珠吸附到離心管側(cè)壁上后,吸棄上清。再重復(fù)此步驟兩次;
蛋白洗脫
在步驟 8 得到的 蛋白-磁珠復(fù)合物中加入 50~250 μL 洗脫緩沖液,置于翻轉(zhuǎn)混合儀上孵育(常溫 10~30min),接著在磁力架上靜置 1 min,待磁珠吸附到離心管側(cè)壁上后,收集上清,即為目的蛋白。
注意事項
1.本產(chǎn)品僅限于科學實驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。
2.避免使用含有 EDTA 或其它金屬螯合劑的試劑,否則會降低磁珠與蛋白的結(jié)合效率。
3.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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