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胰蛋白酶(Trypsin)簡稱胰酶,是一種絲氨酸水解酶,能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基端切斷。在組織細胞的提取、培養(yǎng),以及體外細胞培養(yǎng)過程中,均會使用到胰蛋白酶消化液,用于水解細胞間蛋白質,使組織或細胞離散成單個細胞。胰酶在 37℃ pH 8.0 條件下消化能力*。常用胰酶工作濃度 為 0.25%。 EDTA 可以螯合鈣鎂離子,胰酶溶液中搭配 EDTA 使用可以加速細胞間連接蛋白的水解,起到增強消化的效果。酚紅是一種 pH 指示劑,溶液偏堿性時呈紫紅色,偏酸性時呈橘紅色,近中性時呈粉紅色。
本產品含 0.25%胰蛋白酶,溶于 Hank’s 緩沖液,含 0.9 mM EDTA,無酚紅指示劑,經 0.22 μm 過濾除菌。
訂購信息
產品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 價格 |
0.25%胰蛋白酶消化液(含EDTA,不含酚紅) | AC15L821 | 100 mL | 70 |
運輸與保存
藍冰運輸。-20℃保存,有效期12個月。【注】:避免反復凍融。
使用方法
吸去細胞培養(yǎng)液, 用無菌的 PBS、 Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞去除殘余的血清。
加入適量本產品覆蓋細胞, 室溫靜置消化 1 -5 min。(不同細胞消化時間不同)
顯微鏡下觀察,當細胞出現(xiàn)明顯收縮,用移液槍輕輕吹打細胞較容易將細胞吹打下來時,吸除胰酶細胞消化液,加入含血清的細胞培養(yǎng)液,輕輕吹打下細胞,制成細胞懸液,即可直接傳代培養(yǎng)。【注】:如果用移液槍輕輕吹打時很難使細胞從板底脫落,表明消化時間不夠,可加入胰酶細胞消化液重新消化。切忌避免過度消化。
注意事項
本產品僅限于科學實驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領域。
由于組織或細胞性質不同,實驗人員應依據(jù)具體情況,確定最佳消化時間;消化細胞時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁和生長狀況。
本產品不含抑菌劑,在使用過程中要特別注意無菌操作,避免消化液被微生物污染。
本產品不宜 4℃長期保存,避免反復凍融,建議分裝成小份后 -20℃ 保存。
對于胰酶中 EDTA、 酚紅的選擇,可以根據(jù)實驗需要,對于一般的腫瘤細胞,選擇含 EDTA 的胰酶消化液。對于較敏感、脆弱的細胞,例如原代細胞及很容易消化的細胞,選擇不含 EDTA 的胰酶消化液,如果細胞特別敏感,需要選擇胰蛋白酶濃度更低的消化液。如果是需要用于流式細胞儀檢測細胞凋亡,則選用不含 EDTA 的胰酶消化液。
由于 Hank’s 溶液中 NaHCO3 含量較低,不建議將本產品用于 37℃的 CO2 培養(yǎng)箱中消化,如果放入 CO2 相,溶液會迅速變酸性。
為了您的安全和健康, 請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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