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2023-8-16 閱讀(940)
SF9(昆蟲卵巢細胞)細胞培養教程
SF9(昆蟲卵巢細胞)特點：
1.細胞靜置培養時半貼壁生長，也可以使用搖瓶懸浮培養
靜置培養時細胞會大量附著瓶底生長，呈半貼壁狀態，會有少部分細胞懸浮生長；
搖瓶培養時可以很快適應懸浮生長，呈單個或小聚團懸浮生長；
2.對溫度極為敏感
細胞于26-28℃空氣培養，需要盡量控制溫度，保證細胞生長狀態；
若溫度低于26℃，細胞生長速度會變慢，但恢復溫度后生長速度會逐漸恢復，不會對細胞產生過大傷害；
若溫度28℃-30℃，細胞生長嚴重受限；若溫度高于30℃，細胞將受不可逆傷害導致無法使用，即使溫度恢復也無法恢復正常生長狀態；
同時注意使用的培養基、PBS及其他試劑應復溫至室溫（最好26-28℃），盡量減少觀察細胞次數和時間；
3.細胞對吹打、氣泡等機械損傷敏感
細胞操作時若吹打力度過大、氣泡過多將嚴重影響細胞生長狀態，導致細胞后續存活率降低，注意操作輕柔；
4.細胞可以適應多種培養體系
該細胞多用于真核細胞蛋白表達系統，因此針對該細胞有諸多培養體系，例如Grace's Insect Medium、SF900 II、TNM-FH、ESF921等培養體系，包括含血清的培養體系和不含血清的培養體系，可以根據自身實驗需要選擇逐步更換為合適的培養體系；
5.細胞凍存存活率不高
實際實驗過程中，尚恩發現SF9細胞疑似表現出較低的凍存保存能力，凍存后活率會隨保存時間增加而逐漸下降，因此若有持續培養該細胞或者快速復蘇進行實驗需求的實驗室建議定期復蘇培養細胞并重新凍存以保證細胞凍存活性不會下降至無法接受的范圍；
6.細胞貼壁培養后可能會伸出觸角
細胞在貼壁培養時，一周左右會有部分細胞伸出較長觸角，同一個培養瓶培養時間越長，有觸角的細胞可能越多，這是細胞自然現象，非細胞交叉污染或狀態不佳；
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