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LONZA CC-5035加強版內皮細胞培養基細胞復蘇操作規程
閱讀：2522發布時間：2017-10-31
培養基配制見文《LONZA CC-5035 EGM-Plus內皮細胞培養基配制》。
注意：擴增環境：37°C±1°C, 5% CO 2, 90%±2% 濕度。
1.當起始接種細胞來自凍存細胞，推薦接種密度：
細胞類型 | 推薦凍存后接種密度（活細胞/cm2) | 培養瓶/培養板zui低數量 |
HUVEC | 2500 | ≥5 x T-25 flasks OR ≥1 x T-75 flask
|
HUVEC-XL | 2500 | ≥12 x T-225 flasks OR
|
Non-HUVEC Endothelial
| 5000 | ≥2 x T-25 flasks OR ≥1 x T-75 flask |
備注 | 基于zui低細胞數量和活力估算。更準確接種數量和活性見COA。 | 只要能達到接種密度，也可以使用其他規格的培養板。 |
2.根據推薦接種密度，估算細胞培養容器的數量和有效表面積。
3.按1 ml/5 cm2 在培養容器中添加LONZA CC-5035 EGM-Plus內皮細胞培養基，并且在37°C±1°C, 5% CO 2, 90%±2% 濕度條件下預孵至少30分鐘。
4.打開前先用酒精或異丙醇擦拭凍存管。在無菌環境下，快速扭開蓋子1/4再旋緊。 37°C水浴解凍凍存管，小心不要浸沒管子。隨時關注管子，zui后一點冰也融化后就馬上拿出管子。如果細胞解凍超過2分鐘，會影響實驗結果。
注意：不能用離心方法分離細胞和凍存保護液。這個動作比培養中的DMSO殘留更傷害細胞。
5.使用微量移液器小心混勻細胞懸液，加入培養容器。小心混勻。放回37°C±1°C, 5% CO 2, 90%±2% 濕度培養箱。
注意：內皮細胞比其他細胞更容易貼凍存管壁。要轉移全部細胞需要額外施力（more forceful
trituration）。
LONZA CC-5035 EGM-Plus內皮細胞培養基細胞復蘇規程由紅榮微再翻譯整理。
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LONZA CC-5035 EGM-Plus內皮細胞培養基是原LONZA內皮細胞培養基的加強版，優化用于人臍靜脈內皮細胞（ HUVECs）培養，擴增加速。包含2%FBS和BBE。不含外源VEGF（血管內皮生長因子）。
LONZA CC-5035 EGM-Plus內皮細胞培養基需要混合CC-5036和CC-4542兩個組份。
產品訂購信息（LONZA CC-5035 EGM-Plus內皮細胞培養基）
品牌 | 貨號 | 產品描述 | 包裝 |
LONZA | CC-5035 | EGM-Plus BulletKit (CC-5036 +CC-4542 ) LONZA CC-5035 EGM-Plus內皮細胞培養基 | 1 Kit |
LONZA | CC-5036 | EBM-Plus Endothelial Cell Basal Medium-Plus 內皮細胞基礎培養基，加強版 | 500mL/瓶 |
LONZA | CC-4542 | EGM-Plus SingleQuots 內皮細胞培養基添加劑，加強版 | Kit |
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