氣相色譜之毛細管柱的選擇
一、毛細管柱固定液的選擇
1. 如果不知道使用何種固定相,可以從非極性柱或弱極性柱開始試用,如效果不好,再按極性漸強的順序選用中等極性直至高極性柱逐一嘗試,直到有較令人滿意的分析結果即可確定適用的柱極性。
2. 低流失(“ms”)色譜柱通常更為惰性,有更高的溫度上限,適用于MS檢測器。
3. 使用能夠提供滿意的分離度和分析時間的極性zui小的固定相,非極性固定相比極性固定相具有更長的壽命。
4. 要使用和被分析物極性相近的固定相,使用這一選擇方法常常是有效的,但是使用這一方法并不總是能找到的固定相。
5. 如果被分離混合物具有不同的偶極或氫鍵力,改變使用具有不同偶極或氫鍵力(不一定要更大)的固定相后,會出現其他共流出物,所以新的固定相不一定提供更好的總分離度。
6. 如果可能,要避免使用含有能使選擇性檢測器產生高響應值功能團的固定相,例如含有氰丙基的固定相,用NPD會產生不成比例地增大基線高度(由于柱流失)的現象。
7.以zui少數量的色譜柱能覆蓋zui大范圍的選擇性。
8. PLOT柱用于在高于室溫的柱溫下來分析氣體樣品。
二、毛細管柱內徑的選擇
理論上,柱效率與半徑平方成反比,半徑越小分離效果越好,可是半徑越小,色譜柱的使用困難越多,如要求儀器的靈敏度高、時間常數小、死體積小以及柱前壓大等。而柱內徑大則處理量大,但柱內徑過大,將導致柱內徑不能均勻的分布在色譜柱中。通常使用的毛細管柱內徑可分為:0.53 mm、0.32mm、0.25mm和0.20mm
0.53mm :具有近似填充柱的負荷量,總柱效則遠遠超過填充柱。當達到同樣的分離度時,0.53mm大口徑柱的分析時間明顯快于填充柱,可方便的采用柱上進樣或直接進樣技術,適合于分析不太復雜的樣品,是填充柱理想的替代柱。
0.32mm: 柱效稍低于0.25mm常規柱,負荷量大于常規柱的60%,用特制注射針可做柱上進樣。
0.25mm :zui常用的內徑規格。有較高的柱效,負荷量較低,必須分流進樣或無分流進樣。用于復雜多組份樣品分析。
0.20mm 柱效高,負荷量低,流失較小,適合與質譜等靈敏檢測器聯用.
三、毛細管柱長度的選擇
理論上,柱長越長,總柱效越高,可改善分離能力,短則組分餾出的快些。只有當分析樣品十分復雜時,才需要選擇長柱,柱越長,分析時間也越長,一般分離度增加一倍,柱長必須增長4倍。
5—12m 短柱:分離少于10個組份(不包含難分離物質對)的簡單樣品。
25—30m 中長柱:分離10—50個組份的樣品。
50m 長柱:分離大于50個組份或包含有難分離物質對的復雜樣品。
四、液膜厚度的選擇
選擇適當的液膜厚度就像選擇適當長度一樣重要,恰當的膜厚可以使組分得到更好的分離。
0. 1—0. 2μm 薄液膜
低負荷量,高溫下流失較小,適合于高沸點化合物的分析,適于配高靈敏檢測器。
0.25—0.33μm 標準液厚
一般商品柱的標準液膜。
0.5—5.0μm 厚液膜
較高的樣品負荷量,在高溫下流失較大,適于分析低沸點樣品