美國藥典（USP）擬定新通則<1469>NITROSAMINE IMPURITIES，用于對制藥行業可能存在亞硝胺雜質進行風險評估和控制。該標準的目的是為控制亞硝胺雜質、消除或減少亞硝胺雜質在藥物產品中的存在提供一種基于科學的方法。目前該通則已結束修訂，預計今年下半年正式出版。

建議相關的原料藥/制劑/輔料生廠商和供應商、合同制生產組織、藥品檢測和監管機構、QA/QC專家參考該通則。

USP<1469>與FDA亞硝胺雜質指南基本一致，并且都主張采用基于風險的方法進行評估。USP<1469>確定的應在藥品中檢測的六種亞硝胺包括：N-亞硝基二甲胺（NDMA）、N-亞硝基二乙胺（NDEA）、N-亞硝基二異丙胺（NDIPA）、N-亞硝基乙基異丙胺（NEIPA）、N-亞硝基二丁胺（NDBA）和N-亞硝基甲基氨基丁酸（NMBA）。USP 清單與 FDA 清單的不同之處在于 FDA 清單中的化合物N-亞硝基甲基苯胺（NMPA）不在 USP 清單中。

與FDA一樣，USP<1469>要求對潛在的亞硝胺進行風險評，在風險評估中應充分考慮可能引入亞硝胺的所有潛在來源，包括：

原料藥工藝過程：原料、試劑、溶劑、加工助劑等

原料藥降解物

溶劑降解物

來自于原料、溶劑（回收溶劑）、試劑、催化劑的雜質

來自于中間體和中間體生產帶來的雜質

來自于水、輔料、加工助劑的雜質

制劑加工或包裝材料引入或產生的雜質

亞硝胺雜質的產生機理

此外USP<1469>還遵循 FDA 指南，確保藥物中的亞硝胺雜質每日攝入量不超過可接受攝入量（Acceptable Intake，簡稱AI）。FDA 規定 NDMA 和 NMBA 的AI為 96 ng/day，NDEA、NMPA、NIPEA 和 NDIPA 的AI為 26.5 ng/day。再結合藥品活性成分的每日最大服用劑量（Maximum Daily Dose，簡稱MDD）確定亞硝胺雜質的在該藥品中的（濃度）限度（AI/MDD）。

通則要求單個亞硝胺雜質不超過AI對應的限度，同時對檢出濃度超過LOQ但不超過AI對應限度的多個雜質需咨詢權威機構。筆者注：建議參考FDA的要求。

為了幫助供應商更好地檢測亞硝胺雜質，USP<1469>提出了四種分析方法，生產商可以使用這些方法來檢測其產品中是否存在亞硝胺。

與EP 2.5.42僅限于原料藥不同，USP <1469>適用于原料藥以及制劑，同時要求生廠商對輔料、制劑生產工藝、包裝系統做評估。下表簡單列出二者的差異，供讀者參考。

島津可以為客戶提供USP<1469>通則中的所有4種方法：

關于USP<1469>方法2，原文“Procedure 2: Quantitation of NDMA, NDEA, NDIPA, and NEIPA in selected sartans by GC–MS”，其實看接下來的條件，我們發現分析條件：“Injector: Headspace”，“Acquisition mode：multiple reaction mode (MRM)”，頂空進樣+MRM質譜模式，其實是HS+GC-MS/MS。

應用案例1

島津海外應用工程師參考USP<1469>方法2，對氯沙坦中的亞硝胺雜質進行了研究，在第二法適用的4種亞硝胺（NDMA、NDEA、NDiPA、NEiPA）進行了擴充，增加NDBA、NDPA和NMPrZ。設定MDD為880mg/day，計算代表性的亞硝胺雜質限度，如下表：

使用島津HS-20和GC-MS/MS對方法進行研究，考察線性、準確度（回收率）、LOQ等參數，結果如下：

實驗結果表明，島津儀器性能超越了USP<1469>通則方法的要求，并且擴充了方法的適用范圍，可以為制藥企業風險評估提供精準的幫助！

應用案例2

參考<1469>方法3，使用島津三重四極桿液質聯用儀對奧美沙坦制劑中的六種亞硝胺（NDMA、NDEA、NDIPA、NDBA、NEIPA和NMBA）進行檢測。

0.1ng/mL亞硝胺的MRM質量色譜圖

數據展示：0.1 ng/mL 標準溶液的MRM色譜圖如上圖（該濃度是FDA要求的定量限值的 1/10）。在0.1 - 10 ng/mL濃度范圍內的線性系數>0.99，該濃度范圍內的精密度在80 - 120%，結果優異。

更多應用信息請聯絡島津工作人員！