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上海申知心生物科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： 高血脂癥動(dòng)物模型,心血管疾病動(dòng)物模型,缺血性心臟病動(dòng)物模型 |
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更新時(shí)間：2023-08-29 13:56:45瀏覽次數(shù)：897
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子宮內(nèi)膜異位癥模型實(shí)驗(yàn)介紹：
常用動(dòng)物：大鼠，小鼠，性成熟，8-10周齡
適應(yīng)性飼養(yǎng)后，用消毒棉拭子旋轉(zhuǎn)插入小鼠陰道內(nèi)，并在陰道內(nèi)輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)幾下后取出，涂于載玻片上，用95%酒精固定30min后晾干。涂片進(jìn)行HE染色或瑞士染色，觀察動(dòng)情周期。連續(xù)觀察2周，每日定時(shí)進(jìn)行陰道涂片檢查，觀察動(dòng)情周期。選擇連續(xù)有2個(gè)或2個(gè)以上正常動(dòng)情周期（陰道涂片為大量無核角化細(xì)胞的大鼠），造模前一天每鼠肌注雌二醇0.1mg/(kg.d，大鼠)，使動(dòng)物統(tǒng)一處于動(dòng)情期。
建模方法I：
大鼠：腹腔注射麻醉后，將大鼠固定，腹部剪毛，消毒，并在無菌條件下開腹。在尿道口上約1cm處做垂直正中縱切口長(zhǎng)約2-3cm進(jìn)腹。大鼠子宮呈Y型，分離左側(cè)子宮，近端離左子宮角1cm處結(jié)扎，遠(yuǎn)端離卵巢2cm處結(jié)扎，并結(jié)扎兩端間的子宮系膜血管，切除長(zhǎng)約1.5-2.0cm的子宮段，立即放入盛有生理鹽水的培養(yǎng)皿中，修剪去子宮漿膜外的脂肪組織，縱向切開子宮腔，剝?nèi){膜層及肌層，將子宮內(nèi)膜片剪成5mm×5mm大小，移植到腹壁血管豐富處，注意其內(nèi)膜面與皮下組織貼合。逐層縫合傷口，待老鼠自然蘇醒后常規(guī)飼養(yǎng)。術(shù)后每天注射，共3天。
建模4周后，開腹檢查所有造模大鼠移植的子宮內(nèi)膜是否生長(zhǎng)。若見移植物體積增大，形成表面被覆結(jié)締組織并有血管形成、內(nèi)有液體積聚的透明小囊泡，則證明造模成功。
建模方法II：
小鼠：動(dòng)情期C57BL/6小鼠，脫頸椎法處死，仰臥位固定，腹部酒精消毒后，鋪上無菌治療洞巾，戴無菌手套，在恥骨聯(lián)合上方0.5cm處，沿正中線剖開腹腔。找到Y(jié)形子宮，小心分別牽出左、右側(cè)子宮，細(xì)心分離雙側(cè)子宮系膜。離斷宮角與卵巢，在Y形子宮分叉分別剪斷左側(cè)及右側(cè)子宮，放入裝有10mL37℃生理鹽水的無菌彎盤中，反復(fù)漂洗子宮表面的血跡，進(jìn)一步分離剩余粘附的子宮系膜。將兩個(gè)子宮角分別放置于兩個(gè)無菌彎盤中，將它們直接剪成大小約1mm3的大小均等的碎片，并將它們懸浮于37℃生理鹽水中。將捐贈(zèng)鼠的子宮按1:2的比例接種于受鼠腹腔，用0.3mL生理鹽水懸浮彎盤里的組織碎片。
隨機(jī)取動(dòng)情期C57BL/6小鼠，取臍下0.5cm偏正中線0.5cm處的左下腹為進(jìn)針點(diǎn)，將溶有子宮組織碎片的0.3mL生理鹽水用20號(hào)針頭連同子宮組織快碎片注入接受鼠的腹腔，后放置于鼠籠。直至第9天。隨機(jī)取動(dòng)物，處死后，取異位內(nèi)膜，進(jìn)行冰凍切片制備，HE染色觀察異位內(nèi)膜病灶是否有典型的內(nèi)膜腺體及間質(zhì)，提示復(fù)制動(dòng)物模型是否成功。
分子實(shí)驗(yàn)平臺(tái)：高效運(yùn)作了qRT-PCR、Western blot、雙向電泳技術(shù)、分子克隆與質(zhì)粒構(gòu)建、流式細(xì)胞儀檢測(cè)、免疫共沉淀、染色質(zhì)免疫共沉淀、RNA免疫沉淀、凝膠電泳遷移實(shí)驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定、外泌體抽提及鑒定等實(shí)驗(yàn)。
基因組學(xué)平臺(tái)：可以完成甲基化檢測(cè)、基因芯片分析、高通量測(cè)序等實(shí)驗(yàn)。
蛋白組學(xué)平臺(tái)：能實(shí)現(xiàn)LC-MS、ITRAQ、蛋白質(zhì)修飾分析等重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。
病理學(xué)平臺(tái)：涉及免疫熒光染色、免疫組織化學(xué)染色、HE染色、特殊染色等實(shí)驗(yàn)。
臨床前CRO服務(wù)：主要提供呼吸系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)性疾病的藥效學(xué)評(píng)價(jià)服務(wù)，包括靶點(diǎn)驗(yàn)證、體內(nèi)外模型的構(gòu)建、藥物篩選、藥物分析、藥效性評(píng)價(jià)、藥代
動(dòng)力學(xué)和藥理學(xué)研究以及院內(nèi)制劑研發(fā)等。
項(xiàng)目轉(zhuǎn)化服務(wù)：助力客戶進(jìn)行方案設(shè)計(jì)、聯(lián)合課題申報(bào)、藥物項(xiàng)目引進(jìn)和孵化，解決客戶對(duì)實(shí)驗(yàn)技術(shù)平臺(tái)、專業(yè)人和融資的需求。
