上海申知心生物科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: 高血脂癥動(dòng)物模型,心血管疾病動(dòng)物模型,缺血性心臟病動(dòng)物模型 |
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更新時(shí)間:2023-08-29 13:10:50瀏覽次數(shù):918
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局灶性腦缺血/再灌注損傷模型造模方案:
禁食12h(不禁水)左右的SD大鼠麻醉后取仰臥位,去除頸前被毛、常規(guī)消毒后,頸部正中切口,仔細(xì)分離左側(cè)的頸總動(dòng)脈(CCA),避免損傷迷走神經(jīng)及頸交感干,并向上分離出頸外動(dòng)脈(ECA)和頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA)。在距離CCA分叉較遠(yuǎn)處用醫(yī)用縫合線結(jié)扎CCA和ECA,將CCA和ICA拉成一直線,用*脈夾暫時(shí)阻斷ICA血流,在CCA血管壁上剪一小口,把粗細(xì)適中的線栓自CCA切口插入,沿著CCA分叉處緩慢插入ICA,遇有輕微阻力即停止,此時(shí)線栓的膨大頂端即堵塞大腦中動(dòng)脈的開(kāi)口,在用縫合線固定住線栓,常規(guī)消毒后全層縫合皮膚切口。假手術(shù)組動(dòng)物手術(shù)步驟類(lèi)似,但未作線栓閉塞中動(dòng)脈。造模后的大鼠輕輕的轉(zhuǎn)移到鼠籠里,平躺在適溫墊料上以保持大鼠正常體溫。
栓塞2h后緩慢拔出一部分線栓,使線栓頂端不再閉塞中動(dòng)脈,讓缺血側(cè)腦部血液再灌注。再灌注1h后對(duì)大鼠進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分,屏風(fēng)方法按照Longa法神經(jīng)行為缺損評(píng)分標(biāo)準(zhǔn):沒(méi)有神經(jīng)損傷計(jì)為0分;不能伸出左前爪(輕微神經(jīng)損傷)記為1分;向左繞圈(中度神經(jīng)損傷)記為2分;向左邊傾斜(重度神經(jīng)損傷)記為3分;不能自主行走或失去知覺(jué)記為4分。神經(jīng)功能缺損評(píng)分在2~3分視為模型成功。
分子實(shí)驗(yàn)平臺(tái):高效運(yùn)作了qRT-PCR、Western blot、雙向電泳技術(shù)、分子克隆與質(zhì)粒構(gòu)建、流式細(xì)胞儀檢測(cè)、免疫共沉淀、染色質(zhì)免疫共沉淀、RNA免疫沉淀、凝膠電泳遷移實(shí)驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定、外泌體抽提及鑒定等實(shí)驗(yàn)。
基因組學(xué)平臺(tái):可以完成甲基化檢測(cè)、基因芯片分析、高通量測(cè)序等實(shí)驗(yàn)。
蛋白組學(xué)平臺(tái):能實(shí)現(xiàn)LC-MS、ITRAQ、蛋白質(zhì)修飾分析等重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。
病理學(xué)平臺(tái):涉及免疫熒光染色、免疫組織化學(xué)染色、HE染色、特殊染色等實(shí)驗(yàn)。
臨床前CRO服務(wù):主要提供呼吸系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)性疾病的藥效學(xué)評(píng)價(jià)服務(wù),包括靶點(diǎn)驗(yàn)證、體內(nèi)外模型的構(gòu)建、藥物篩選、藥物分析、藥效性評(píng)價(jià)、藥代動(dòng)力學(xué)和藥理學(xué)研究以及院內(nèi)制劑研發(fā)等。
項(xiàng)目轉(zhuǎn)化服務(wù):助力客戶(hù)進(jìn)行方案設(shè)計(jì)、聯(lián)合課題申報(bào)、藥物項(xiàng)目引進(jìn)和孵化,解決客戶(hù)對(duì)實(shí)驗(yàn)技術(shù)平臺(tái)、專(zhuān)業(yè)人和融資的需求;