上海申知心生物科技有限公司
主營產品: 高血脂癥動物模型,心血管疾病動物模型,缺血性心臟病動物模型 |
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更新時間:2023-08-29 10:07:41瀏覽次數:1636
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上海細胞劃痕實驗.
細胞劃痕實驗是一種簡單易行的檢測細胞運動的方法,可以用來檢測貼壁生長腫瘤細胞的侵襲轉移能力。
上海細胞劃痕實驗.實驗內容:
材料:6孔板(其他的也可以,但感覺6孔比較好,大小適中),MARKER筆,直尺,20微升槍頭(滅菌),無血清培養基,PBS
步驟:能滅菌的器械都要滅菌。MARKER筆,直尺在操作前紫外照射30MIN(超凈臺內)
1.先用MARKER筆在6孔板背后,用直尺比著,均勻地劃橫線,大約每隔0.5-1cm一道,橫穿過孔,每孔至少穿過5條線。
2. 在空中加入約5*105個細胞,具體數量因細胞不同而不同,掌握為過液能鋪滿
3. 第二天用槍頭比著直尺,盡量垂直于背后的橫線劃痕,槍頭要垂直,不能傾斜
4. 用PBS洗細胞3次,去除劃下的細胞,加入無血清培養基。
5.放入37度5%CO2培養箱,培養,按0. 6 .12 24小時取樣,拍照。
注意事項:
一般做劃痕實驗,一般都在無血清或者低血清狀態下培養的,否則細胞增殖就不能忽略
按照6孔板背后劃線的垂直方向劃痕,可以形成若干交叉點,作為固定的監測點,這就解決了前后觀察時位置不固定的問題。