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上海申知心生物科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： 高血脂癥動(dòng)物模型,心血管疾病動(dòng)物模型,缺血性心臟病動(dòng)物模型 |
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更新時(shí)間：2023-08-28 09:46:38瀏覽次數(shù)：1354
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上海免疫共沉淀（Co-IP）
Co-IP是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)功能的實(shí)驗(yàn)方法。Co-IP是在IP的基礎(chǔ)上衍生出來(lái)的實(shí)驗(yàn)方法，是證明蛋白相互作用的金標(biāo)準(zhǔn)。通過(guò)檢測(cè)免疫沉淀下來(lái)的蛋白復(fù)合物來(lái)證實(shí)中是否存在與X蛋白相互作用的Y蛋白。其基本原理是，在細(xì)胞裂解液中加入抗X蛋白的抗體，孵育后再加入與抗體FC片段特異結(jié)合的Protein A/G-瓊脂糖微珠，若細(xì)胞中有與Y結(jié)合的X蛋白，就可以形成這樣一種復(fù)合物： Y—X—抗X抗體—Protein A或G ，經(jīng)變性聚丙烯酰胺凝膠電泳，復(fù)合物又被分開。然后經(jīng)免疫印跡或質(zhì)譜檢測(cè)目的蛋白。這種方法得到的目的蛋白是在細(xì)胞內(nèi)與興趣蛋白天然結(jié)合的，符合體內(nèi)實(shí)際情況，得到的結(jié)果可信度高。
上海免疫共沉淀（Co-IP）
客戶需要注意的是Co-IP方法可能檢測(cè)不到低親和力和瞬間的蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)相互作用；同時(shí)如果檢測(cè)到有相互作用并不能完整表明生理狀態(tài)下共定位，此外檢測(cè)到的兩種蛋白質(zhì)的結(jié)合可能不是直接結(jié)合，而可能有第三者在中間起橋梁作用；后在實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)目的蛋白是什么，以選擇后檢測(cè)的抗體，所以，若預(yù)測(cè)不正確，實(shí)驗(yàn)就得不到結(jié)果，方法本身具有風(fēng)險(xiǎn),另外客戶可以選擇Co-IP得到的樣品利用質(zhì)譜進(jìn)行后續(xù)分析.
服務(wù)內(nèi)容和流程：
1）用其特定蛋白的抗體與ProteinA/G相結(jié)合(Flag IP Kit已結(jié)合上)；
2）用抗體成點(diǎn)特定蛋白，特定蛋白已結(jié)合了與其相互作用蛋白；
3）通過(guò)洗滌得到純復(fù)合蛋白后用感興趣蛋白抗體通過(guò)WB方法檢測(cè)其IP結(jié)果；
4）提交WB圖與分析結(jié)果和實(shí)驗(yàn)報(bào)告。
您只需提供：
表達(dá)待研究蛋白的細(xì)胞以及相關(guān)的抗體。
我們提供：
完整的免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)報(bào)告單。電子版掃膜結(jié)果及灰度值分析。
