目錄:上海一研生物科技有限公司>>原代細(xì)胞>>其它類(lèi)原代細(xì)胞>> 狗臟器組織中性粒細(xì)胞
| 參考價(jià) | ￥2600-￥6000 | /件 |
參考價(jià)：￥2600 ~ ￥6000
更新時(shí)間：2024-02-29 12:29:14瀏覽次數(shù)：191評(píng)價(jià)
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | EY-XY4149 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) | 生長(zhǎng)特性 | 懸浮生長(zhǎng) |
| 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 英文名稱(chēng) | dog organ tissues neutrophil |
| 種屬來(lái)源 | 狗 |
原代細(xì)胞的分離培養(yǎng)：
原代培養(yǎng)即直接從有機(jī)體取下細(xì)胞、組織或器官，讓它們?cè)隗w外維持與生長(zhǎng)。原代培養(yǎng)的特點(diǎn)是細(xì)胞或組織剛離開(kāi)機(jī)體，它們的生物性狀尚未發(fā)生很大的改變，在一定程度上可反映它們?cè)隗w內(nèi)的狀態(tài)，表現(xiàn)出來(lái)源組織或細(xì)胞的特性， 因此用于藥物實(shí)驗(yàn)，尤其是藥物對(duì)細(xì)胞活動(dòng)、結(jié)構(gòu)、代謝、有無(wú)毒性或殺傷作用等，是的工具。常用的原代培養(yǎng)法有組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法。
（一）組織塊培養(yǎng)法
許多實(shí)驗(yàn)室喜歡用組織塊培養(yǎng)法進(jìn)行原代培養(yǎng)，因?yàn)榉椒ê?jiǎn)單，細(xì)胞也較容易生長(zhǎng)。尤其是培養(yǎng)心肌，有時(shí)還可觀察到心肌組織塊搏動(dòng)。細(xì)胞從組織塊邊緣向外長(zhǎng)出并鋪滿(mǎn)培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶后， 即可進(jìn)行傳代。
1. 設(shè)備材料
培養(yǎng)箱、冰箱、超凈工作臺(tái)／無(wú)菌間、無(wú)菌吸管、離心管、酒精燈、試管架、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、消化液、基礎(chǔ)培養(yǎng)液、胎牛血清、Hanks 溶液、雙抗試液、剪刀、攝子、小燒杯。
2. 操作步驟
（1） 在無(wú)菌條件下，取待培養(yǎng)的組織適量，置入小燒杯中， 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次，去掉組織塊表面的血污。
（2）用眼科剪將組織塊反復(fù)剪成0.5~ 1mm3的小塊。
（3）再用Hanks 溶液反復(fù)漂洗， 直至液體不混濁為止。等組織塊下沉，將燒杯傾斜，用小吸管盡量吸除Hanks 溶液。
（4）用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml、200μg/ml）的培養(yǎng)液再清洗，用吸管吸干后加入5ml 含20％血清的培養(yǎng)液。
（5）用彎頭吸管吸取組織小塊，均勻地置于培養(yǎng)皿內(nèi)表面，吸去多余的培養(yǎng)液，各組織小塊之間相距0.5cm 為宜。蓋好培養(yǎng)皿蓋，做好標(biāo)記， 置37°C 的CO2培養(yǎng)箱內(nèi)。
（6） 2~4h 后，于超凈工作臺(tái)中，緩緩地向培養(yǎng)皿中加入上述含20％血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml ）的培養(yǎng)液少量，以使組織塊浸沒(méi)在培養(yǎng)液中。
（7）輕輕地將培養(yǎng)皿及組織塊移至CO2 培養(yǎng)箱， 如無(wú)特殊情況，不必觀察。1~2 周后，可觀察到細(xì)胞從組織塊邊緣長(zhǎng)出，形成生長(zhǎng)暈。
（9） 一般說(shuō)來(lái)，若培養(yǎng)液無(wú)明顯改變， 1 周換液1 次即可。待細(xì)胞長(zhǎng)滿(mǎn)整個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)表面，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
狗臟器組織中性粒細(xì)胞
細(xì)胞基本屬性：
產(chǎn)品名稱(chēng) | 狗臟器組織中性粒細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 臟器組織 |
種屬 | 狗 | 生長(zhǎng)特性 | 懸浮生長(zhǎng) |
分離方法 | 通過(guò)密度梯度離心法獲得 | 英文名稱(chēng) | dog organ tissues neutrophil |
貨號(hào) | EY-XY4149 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
細(xì)胞鑒定：CD11b/Integrin alpha M+、CD15+、CD45+或CD18+免疫熒光染色為陽(yáng)性，細(xì)胞純度高于90%
支原體檢測(cè)：狗臟器組織中性粒細(xì)胞不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基：狗臟器組織中性粒細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件：無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存
細(xì)胞代數(shù)：第1代
產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨，1周左右
運(yùn)輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞（包郵）
供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究，絕不可作為動(dòng)物或人類(lèi)疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹：
中性粒細(xì)胞(neutrophil)是在瑞氏(Wright)染色血涂片中，胞質(zhì)呈無(wú)色或極淺的淡紅色，有許多彌散分布的細(xì)小的(0.2~0.4微米)淺紅或淺紫色的顆粒。細(xì)胞核呈桿狀或2~5分葉狀，葉與葉間有細(xì)絲相連。中性粒細(xì)胞具趨化作用、吞噬作用和殺菌作用。中性粒細(xì)胞來(lái)源于骨髓，具有分葉形或桿狀的核，胞漿內(nèi)含有大量既不嗜堿也不嗜酸的中性細(xì)顆粒。這些顆粒多是溶酶體，內(nèi)含髓過(guò)氧化酶、、堿性磷酸酶和酸性水解酶等豐富的酶類(lèi)，與細(xì)胞的吞噬和消化功能有關(guān)。 |
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠p53(p53)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat glycogen phosphorylase isoenzyme BB (GP-BB) ELISA Kit 大鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒
HumanAndrostenedione,ASDELISAKit 人雄(ASD)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumancoagulationfactorⅩ,FⅩELISA試劑盒人Ⅹ(FⅩ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
組蛋白轉(zhuǎn)甲基酶活性檢測(cè)試劑盒(H3-K4)20次
HumaeplicationproteinA,RPA-70ELISAKit人復(fù)制蛋白A(RPA-70)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human soluble adhesion molecule (Sam) ELISA Kit 人可溶性粘附分子(Sam)ELISA試劑盒
Humancadherln-relatedneuronalreceptor1,C-1ELISAKit 人鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1(C-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor1,3-DPG(Human1,3-Disphosphoglycerate,ELISAKit人1,3-二0酸甘油酸規(guī)格：48T/96T
飲料比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
MouseKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISAKit小鼠腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
狗臟器組織中性粒細(xì)胞小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1 英文名稱(chēng)： Ttansforming Growth Factor -β1 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫(xiě)： TGF-β1
小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β2 英文名稱(chēng)： Ttansforming Growth Factor -β2 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫(xiě)： TGF-β2
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-1 英文名稱(chēng)： Tissue inhibitors of metalloproteinases 1 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫(xiě)： TIMP-1
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-2 英文名稱(chēng)： Tissue inhibitors of metalloproteinases 2 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫(xiě)： TIMP-2
操作方法：
組織塊直接培養(yǎng)法（原代細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)）
材料與儀器
【動(dòng)物】選擇大約一半足孕時(shí)間的胚胎，10－13天齡胚胎含有最大數(shù)量的未分化的間質(zhì)細(xì)胞，成纖維細(xì)胞可從這些細(xì)胞衍生獲得。每組小鼠胚胎1個(gè)【實(shí)驗(yàn)材料】每組的超凈臺(tái)中有以下物品：1.50ml配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS)1瓶；100ml 0.25%瓶；PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個(gè)；3、50ml離心筒2個(gè)4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)5、1ml，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊；7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；8、酒精燈1臺(tái)；
步驟
1) 胚胎的分離。適用哺乳動(dòng)物(倉(cāng)鼠、小鼠和大鼠)2)將1－2個(gè)胚胎轉(zhuǎn)移至一個(gè)小的無(wú)菌培養(yǎng)皿中，用新的無(wú)菌剪刀小心地絞碎胚胎，用PBS漂洗。3)在無(wú)菌狀態(tài)下，將絞碎的胚胎轉(zhuǎn)移于一50ml的無(wú)菌離心筒中,加入40ml 0.25％的無(wú)菌,用攪拌棒輕輕攪動(dòng)。4)在溫暖的環(huán)境中或置于37°C培養(yǎng)箱中輕輕搖動(dòng)15分鐘。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降，將含有懸浮細(xì)胞的液體轉(zhuǎn)移至一無(wú)菌50ml的離心管中，該管內(nèi)按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見(jiàn)前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來(lái)的50ml離心筒中，重復(fù)步驟4和5。7)離心混合的細(xì)胞懸液，1200r/rain，5分鐘，棄上清。8)用新鮮的無(wú)菌PBS重懸沉淀的細(xì)胞，按步驟7再次離心。9)用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞直至上清清亮為止。
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