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目錄:上海一研生物科技有限公司>>生化檢測試劑盒>>糖酵解系列>> 3磷酸甘油酸激酶(PGK)生化檢測試劑盒

3磷酸甘油酸激酶(PGK)生化檢測試劑盒
  • 3磷酸甘油酸激酶(PGK)生化檢測試劑盒
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參考價4000-7600
具體成交價以合同協議為準

參考價:¥4000 ~ ¥7600

具體成交價以合同協議為準
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規格

100管/96樣 50管/48樣

屬性

供貨周期:現貨 規格:100管/96樣、50管/48樣 貨號:EY-01S1168 應用領域:生物產業 主要用途:僅供科研實驗

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規格
100管/96樣7600元30盒可售
50管/48樣4000元30盒可售

更新時間:2023-11-11 18:15:04瀏覽次數:1014評價

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供貨周期 現貨 規格 100管/96樣、50管/48樣
貨號 EY-01S1168 應用領域 生物產業
主要用途 僅供科研實驗
3磷酸甘油酸激酶(PGK)生化檢測試劑盒廣泛存在于動植物和微生物體內,催化1,3-二磷酸甘油酸轉變為3-磷酸甘油酸,產生1分子ATP,具有影響DNA復制和修補及刺激病毒RNA合成等生物學功能,廣泛應用于藥物靶標設計。

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產品名稱:3磷酸甘油酸激酶(PGK)生化檢測試劑盒

規格:100管/96樣、50管/48樣

貨號 : EY-01S1168

測試方法:微量法、紫外分光光度法

分類:糖酵解系列

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測定意義

3-磷酸甘油酸激酶是糖酵解的關鍵酶,廣泛存在于動植物和微生物體內,催化1,3-二磷酸甘油酸轉變為3-磷酸甘油酸,產生1分子ATP,具有影響DNA復制和修補及刺激病毒RNA合成等生物學功能,廣泛應用于藥物靶標設計。

測定原理

3-磷酸甘油酸激酶催化3-磷酸甘油酸和ATP產生1,3-二磷酸甘油酸和ADP,1,3-二磷酸甘油酸在3-磷酸甘油醛脫氫酶和NADH作用下產生3-磷酸甘油醛、NAD和磷酸,340nm處的吸光度變化反映了3-磷酸甘油酸激酶的活性的高低。

自備實驗用品及儀器

天平、低溫離心機、研缽、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板(UV板)。

自備儀器和用品:

研缽、冰、低溫離心機、紫外分光光度計、1mL石英比色皿、可調式移液器和蒸餾水。



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試劑一:液體×1瓶,室溫保存。

試劑二:液體×1瓶,4℃保存。              

試劑三:粉劑×2瓶,-20℃保存。臨用前加入22mL試劑二,現配現用。

試劑四:液體×1支,4℃保存。

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1、組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。16000g,4℃離心20min,取上清置冰上待測。

2、細菌、真菌:按照細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);16000g, 4℃離心20min,取上清液置冰上待測。

3、血清等液體:直接測定。

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(1)按照蛋白濃度計算

活性單位定義:25℃中每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(Cpr×V樣)÷T

=1608×△÷Cpr

(2)按照樣本質量計算

活性單位定義:25℃中每克組織每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

ADH (nmol/min/g鮮重) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(W×V樣÷V樣總)÷T

=1608×△A÷W

(3)按細胞數量計算

活性單位定義:25℃中每104個細胞每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反總×109)÷(細胞數量×V樣÷V樣總)÷T

=1608×△A ÷細胞數量

(4)按液體體積計算

活性單位定義:25℃中每毫升血清每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

ADH (nmol/min/mL) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷V樣÷T

=1608×△A

ε:NADH摩爾消光系數,6.22×103L/mol/cm;d:比色皿光徑,1 cm;V反總:反應體系總體積,1000μL=0.001 L;Cpr:上清液蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;V樣:加入反應體系中上清液體積,100μL=0.1 mL;T:反應時間,1min。



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