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目錄:上海一研生物科技有限公司>>細胞分析>>細胞因子及蛋白 /細胞因子>> 重組人TNF相關的凋亡誘導配體(TRAIL)

重組人TNF相關的凋亡誘導配體(TRAIL)
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更新時間:2024-11-25 16:45:57瀏覽次數:618評價

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供貨周期 現貨 規格 10 μg/50 μg/100 μg
貨號 EY-01X8626 應用領域 化工
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商品屬性:

產品名稱

重組人TNF相關的凋亡誘導配體(TRAIL

英文名稱

Human TRAIL   protein

規格

10 μg/50 μg/100 μg

貨號

EY-01X8626

運輸條件

藍冰運輸

用途

僅供科研研究實驗

背景:

腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(TRAIL)編碼的蛋白是一種細胞因子,屬于腫瘤壞死因子(TNF)配體家族。該蛋白優先誘導轉化的和腫瘤細胞的凋亡,但似乎不會殺死正常細胞,盡管它在大多數正常組織中均以顯著水平表達。該蛋白與其受體的結合已顯示可觸發MAPK8/JNK,胱天蛋白酶8和胱天蛋白酶3的激活。

重組人TNF相關的凋亡誘導配體(TRAIL)

標記:

1.將細胞培養基與EdU溶液按照500:1的比例混合,制成2×EdU標記培養基。

2.提前將2×EdU標記培養基預熱,然后將150微升2×EdU標記培養基與等體積細胞培養基混合,獲得1×EdU溶液。

【注】:①不建議替換全部培養基,這樣可能會影響細胞增殖的速度。②配置好的培養基建議現用現配,用量以沒過細胞為宜。

3.孵育細胞2 h,棄培養基。

【注】:①培養時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態。②大多數腫瘤細胞以及粘附細胞系均可采用2 h的孵育時間。

4.以1xPBS清洗細胞兩次,每次5 min, 以除去未摻入DNA的EdU殘留。

【注】:對于貼壁不牢的細胞可降低清洗強度。

重組人TNF相關的凋亡誘導配體(TRAIL)

實驗步驟:

1. 將細胞以 104-105 個細胞/孔的密度接種在 96 孔板 中,加入 100μL 培養基,含或不含待測化合物。在 CO2 培養箱中在 37℃ 下培養細胞 24 小時。

2. 向板中加入 10μL 不同濃度的待測物質。

3. 在培養箱中將培養板培養適當時間(如 6、12、24 或 48 小時)。

4. 向板的每個孔中加入 10μL CCK-8 溶液。小心不要將氣泡引入孔中。

5. 將平板在培養箱中孵育 1-4 小時。

6. 在讀板之前,在定軌振蕩器上輕輕混勻。

7. 使用酶標儀測量 450nm 處的吸光度。

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