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目錄:上海一研生物科技有限公司>>生化檢測試劑盒>>蔗糖系列>> 海藻糖6磷酸酯酶(TPP)生化檢測試劑盒

海藻糖6磷酸酯酶(TPP)生化檢測試劑盒
  • 海藻糖6磷酸酯酶(TPP)生化檢測試劑盒
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參考價300-5000/盒
具體成交價以合同協議為準

參考價:¥300 ~ ¥5000

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更新時間:2023-11-07 11:09:27瀏覽次數:930評價

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供貨周期 現貨 規格 100管/48樣 50管/24樣
貨號 EY-01S1230 應用領域 生物產業
主要用途 僅用于科研
海藻糖6磷酸酯酶(TPP)生化檢測試劑盒海藻糖又稱為漏蘆糖、蕈糖,是由兩個糖分子組成的一個非還原性雙糖,能夠在高溫、高寒、高滲透壓及干燥失水等惡劣環境條件下在細胞表面形成的保護膜,有效地保護生物分子結構不被破壞,從而維持生命體的生命過程和生物特征。

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產品名稱

規格

貨號

海藻糖6磷酸酯酶(TPP)生化檢測試劑盒

100/48 50/24   

EY-01S1230

 

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測定意義:

海藻糖又稱為漏蘆糖、蕈糖,是由兩個糖分子組成的一個非還原性雙糖,能夠在高溫、高寒、高滲透壓及干燥失水等惡劣環境條件下在細胞表面形成的保護膜,有效地保護生物分子結構不被破壞,從而維持生命體的生命過程和生物特征。

植物體內主要以糖為底物合成海藻糖,海藻糖-6-磷酸酯酶 trehalose 6-phosphate phosphataseTPP)是該途徑中海藻糖合成關鍵酶之一,該反應首先在海藻糖-6-磷酸合成酶(trehalose-6-phosphate synthaseTPS)的作用下,催化尿苷二磷酸糖(UDPG)和 6-磷酸糖生成中間產物6-磷酸海藻糖,再在TPP的作用下去磷酸化,生成海藻糖。

測定原理:

TPP 催化海藻糖-6-磷酸產生海藻糖,同時釋放出磷酸根,使用鉬銻抗比色法測定。

需自備的儀器和用品:

酶標儀、水浴鍋、可調式移液器、96 孔板、研缽、冰和蒸餾水。





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試劑一:液體×1瓶,室溫保存。

試劑二:液體×1瓶,4℃保存。              

試劑三:粉劑×2瓶,-20℃保存。臨用前加入22mL試劑二,現配現用。

試劑四:液體×1支,4℃保存。


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1、組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。16000g,4℃離心20min,取上清置冰上待測。

2、細菌、真菌:按照細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);16000g, 4℃離心20min,取上清液置冰上待測。

3、血清等液體:直接測定。


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(1)按照蛋白濃度計算

活性單位定義:25℃中每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(Cpr×V樣)÷T

=1608×△÷Cpr

(2)按照樣本質量計算

活性單位定義:25℃中每克組織每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

ADH (nmol/min/g鮮重) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(W×V樣÷V樣總)÷T

=1608×△A÷W

(3)按細胞數量計算

活性單位定義:25℃中每104個細胞每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反總×109)÷(細胞數量×V樣÷V樣總)÷T

=1608×△A ÷細胞數量

(4)按液體體積計算

活性單位定義:25℃中每毫升血清每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

ADH (nmol/min/mL) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷V樣÷T

=1608×△A

ε:NADH摩爾消光系數,6.22×103L/mol/cm;d:比色皿光徑,1 cm;V反總:反應體系總體積,1000μL=0.001 L;Cpr:上清液蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;V樣:加入反應體系中上清液體積,100μL=0.1 mL;T:反應時間,1min。


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