詳細介紹
GenomONE®-Neo EX 仙臺病毒包膜轉染試劑
可用于DNA、siRNA、ODN及蛋白轉染!
◆原理
待轉移的分子(如DNA,蛋白,Antisense Oligonucleotide, siRNA等)與HVJ-Envelope (HVJ-E) 混合后,形成了HVJ-E載體。利用病毒衣殼蛋白的侵染能力,在融合蛋白(F)的作用下,直接與細胞融合,將分子轉入目標細胞或組織。
* HVJ-E:Hemagglutinating Virus of Japan Envelope。
** 現已有200多篇文獻使用該試劑盒,如需樣本案例,請向我司索取。
◆優點、特色
目前市面上少有的轉染試劑盒,可用于細胞、組織和活體動物。可用于:
siRNA
少量siRNA也可高效發揮敲除作用,無需化學修飾siRNA,高表達量。
DNA
無論序列長短、線性或環狀均可
Oligonucleotides
DNA、RNA
蛋白
保持酶和抗體的功能性與特異性
體內轉染 !!
大量操作和文獻引用證明HVJ-E載體可直接將目標分子轉移到活體動物產生作用。
高通量篩選
可同時轉染多種分子
1. 運用范圍廣
GenomONE HVJ-E載體試劑盒可將多種分子(質粒DNA、siRNA、寡核苷酸、蛋白、抗體等)轉進培養細胞(貼壁和非貼壁細胞)和組織。也可用于敏感原代細胞和 活體動物轉染。每種領域的GenomONE®-Neo EX運用情況,均有大量文獻報道。(如需文獻列表,請向我司索取)
2. 安全性
與陽離子脂質體不同,GenomONE®-Neo EX是通過膜融合作用將分子導入細胞,而脂質體轉染的內吞作用可能造成轉染分子經溶酶體作用而降解。GenomONE®-Neo EX內含*滅活的HVJ病毒顆粒,其具有侵染力而無潛在增殖能力,使用非常安全,無需特殊的防護措施
3. 方便簡單
GenomONE 即開即用,試劑盒內包含了操作中主要使用的HVJ-E凍干粉和各種輔助試劑
◆案例、應用
GenomONE®-Neo EX和傳統的脂質體轉染和電穿孔法相比,有更高的轉染效率和更低的細胞毒性,可更有效的發揮siRNA的knock-down作用。
■ in vivo
【大鼠頜下腺逆行注射siRNA】
Ca2+-dependent Cl channel protein (rCLCA)表達的特異性抑制。
免疫染色
non-injection side rCLCA siRNA-injection side
rCLCA siRNA(2 nmol)和GenomONE-Neo(2AU)混合后,以逆行注射的方式注入大鼠頜下腺。四十八小時后,用免疫染色檢驗siRNA注射對氯離子通道蛋白表達的抑制作用。
ST:紋狀管,G:顆粒曲管,A:腺泡
【相關文獻】
K. Ishibashi et al., J. Dent. Res., 85(12), 1101-1105 (2006).
■ in vitro
【難轉染細胞——U937細胞RNAi】
總所周知,用脂質體和電轉的方法將siRNA轉到U937人單核細胞白血病細胞中非常困難,但我們通過實驗證明,siRNA與GenomONE-Neo結合后轉染該細胞,其knock-down效率可達85%以上。
♦ U937細胞經siRNA轉染72小時后收集,用RT-PCR和WB分別檢測mRNA和蛋白量的變化情況。
Real-time PCR Western blotting
左圖:轉染Cathepsin G的特異性siRNA后,其對應的mRNA減少到14%
右圖:轉染Cathepsin G的特異性siRNA后,其蛋白水平減少到15%
【相關文獻】
Y. Tsuchiya et al, Free Radical Biology & Medicine, 43, 1604-1615 (2007).
◆試劑盒組成
產品編號 | 凍干 HVJ-E (滅活HVJ) | 試劑A (增強融合) | 試劑B (融合試劑) | 試劑C (增強導入) | 緩沖液 (用于懸浮和稀釋?) |
385-18731 | 1 vial | 1 vial | 1 vial | 1 vial | 1 vial |
381-18733 | 4 vials | 1 vial | 1 vial | 1 vial | 1 vial |
385-18736 | 40 vials | 10 vials | 10 vials | 10 vials | 10 vials |
◆產品列表
產品編號 | 產品名稱 | 規格 |
385-18731 | GenomONE® Neo EX(FD)轉染試劑套裝 | 1 set |
381-18733 | 4 sets | |
389-18734 | 16 sets | |
385-18736 | 40 sets |