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純度 | 99% | 供貨周期 | 現貨 |
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規格 | 96T/48T | 貨號 | XY-PAP-RU |
應用領域 | 醫療衛生,環保,化工,生物產業,農業 | 主要用途 | 兔 PAP ELISA試劑盒是以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對 |
兔 PAP ELISA試劑盒
產品名稱:PAP試劑盒
產品編號:XY-PAP-RU
產品規格:96T/48T
檢測類型:雙抗夾心法
形式:預包被96孔板
檢測樣本類型:細胞上清液,血清,血漿
上樣量:100ul
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實驗原理
ELISA是以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的實驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應物,從而保證試驗結果的特異性與穩定性。
樣本要求
1、標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20攝氏度保存,但應避免反復凍融。
2、不能檢測含NAN3的樣品,因NAN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
3、以上是通用的樣本處理方法,無法涵蓋各種樣本,對于一些特殊樣本,建議實驗人員多參考已發表的文獻,自行設計合理的樣本處理方法。
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常用問題及解決方法:
標準曲線差:
可能原因 | 解決方案 |
吸取及洗滌不充分 | 充分的吸取及洗滌 |
移液不準確 | 檢查和校正移液器 |
精密度低:
可能原因 | 解決方案 |
洗滌不充分 | 按說明書要求充分洗滌和浸泡 |
混勻不充分和吸取試劑不足 | 充分混勻和吸取試劑 |
重復利用吸頭、容器和履膜 | 使用加樣器要更新新的吸頭、使用新的容器和履膜 |
加樣不準確 | 檢查和校正移液器 |
OD值低:
可能原因 | 解決方案 |
每孔加的試劑量不準確 | 校正移液器,準確加入試劑 |
溫育時間不正確 | 保證充足的溫育時間 |
溫育溫度不正確 | 試劑要平衡至室溫并保證準確的溫育溫度 |
酶標記物或底物失效 | 通過混合酶標記物和底物、顏色應 |
沒有加入終止液 | 按照說明書實驗操作步驟加入終止液 |
超出讀數時間讀數 | 在說明書推薦的讀數時間內讀數 |
樣本值不準確:
可能原因 | 解決方案 |
不正確的樣本儲存方式 | 正確儲存樣本,使用新鮮樣本時行實驗 |
不正確的樣本收集和處理方法 | 采取正確的樣本收集和處理方法 |
代測物質在樣本中含量低 | 使用新鮮樣本,重復實驗 |
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標本受細菌污染 因菌體中可能含有內源性辣根過氧化物酶,因此,被細菌污染的標本同溶血標本一樣,亦可產生非特異性顯色而干擾測定結果。
標本保存不當 在冰箱中保存過久的標本,血清中IgG可聚合成多聚體、AFP可形成二聚體,在間接法ELISA測定中會導致本底過深、甚至造成假陽性;標本放置時間過長(如一天以上),有時抗原或抗體免疫活性減弱,亦可出現假陰性。為克服上述干擾,人巨噬細胞替代激活相關化學因子1(AmAC-1)檢測試劑盒測定的血清標本宜為新鮮采集;如不能立即測定,5天內測定的血清標本可存放于4℃,1周后測定的血清標本應低溫凍存;凍存后融解的標本,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混合后再測定,但混勻時應輕柔,不可強烈振蕩。
標本凝集不全 在沒有促凝劑和抗凝劑存在的情況下,正常血液采集后1/2~2h開始凝固,18~24h*凝固。臨床檢驗工作中,有時為了爭取時間快速檢測,常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清,此時的血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在人巨噬細胞替代激活相關化學因子1(AmAC-1)檢測試劑盒測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結果;這類情況于次日復查時因血凝已*,血清中不再有纖維蛋白原存在,故復查結果變為陰性。為避免上述干擾作用,解決的辦法是血液標本采集后必須使其充分凝固后再分離血清,或標本采集時用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當的促凝劑。
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