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更新時間：2024-11-21 11:09:03瀏覽次數：2411
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CALCRL&RAMP1 CRE-Luc HEK293 CALCRL&RAMP1 CRE-Luc HEK293
| I. Background | |
| 降鈣素基因相關肽(CGRP)家族包括 CGRP 本身、降鈣素(CT)、腎上腺髓質素(AM)和 胰島淀粉樣肽(AMY)。 神經肽降鈣素基因相關肽(CGRP)是中樞和外周神經元產生的一種有效的血管擴張劑。 CGRP 在人體內以α - CGRP 和β - CGRP 兩種形式存在。α - CGRP 和β - CGRP 都是受體的激動劑。CGRP 通過 CGRP 受體介導其作用，CGRP 受體是一種異二聚體復合物：G 蛋 白偶聯受體 CALCRL 和單跨膜結構域蛋白受體 RAMP1。功能 CGRP 受體所需的最后一個 成分是受體成分蛋白(RCP)。缺乏 RCP 已被證明會影響 CGRP 受體的激活，以 (cAMP)的增加來衡量，而不影響配體的結合。受體的主要功能單元 CALCRL(也稱為 CLR 或 CRLR)可以連接到三種 RAMPs 中的一種，這三種 RAMPs 分別產生不同的受體。 RAMPs 是單跨膜蛋白，對受體功能至關重要，因為它們參與受體復合物向質膜的易位，并 進一步提供配體結合的特異性。CALCRL 與 RAMP1 組成 CGRP 受體；RAMP2 是 AM 受 體，命名為 AM1；RAMP3 是 CGRP/AM 雙受體，命名為 AM2。RAMP1 亞基負責 CGRP 與 CGRP 受體的特異性結合。 配體結合后，復合物與 G 蛋白相互作用，Gαs 亞基從復合物中分離并激活腺苷酸環化 酶，產生 cAMP。細胞內 cAMP 濃度升高刺激 cAMP 依賴的信號通路，最終導致轉錄因子 cAMP 應答元件結合蛋白(CREB)與 CRE 啟動子結合，誘導基因表達。 | |
| II. Description | |
CALCRL&RAMP1 CRE-Luc HEK293 報告基因藥靶模型很好的模擬了體內 CGRP 的信 號轉導過程，原理見下圖所示。 | |
Figure 1. CALCRL&RAMP1 CRE-Luc HEK293 細胞模型原理圖 | |
| III. Introduction | |
| Host Cell: | HEK293 |
| Stability: | 20 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.) |
| Freeze Medium: | 90% FBS+10% DMSO |
| Culture Medium: | DMEM+10%FBS+2 μg/ml puromycin+ 5 μg/ml blasticidin |
| Mycoplasma Status: | Negative |
| Storage: | Liquid nitrogen immediately upon delivery |
| Application(s): | Functional assay for CALCRL |
| Transducer: | Gs |
| IV. Description of Host Cell Line | |
| Organism: | Human |
| Tissue: | kidney |
| Morphology: | Epithelial |
| Growth Properties: | Adherent |
| V. Representative Data | |
Figure 2. Dose Response of Agonists in CALCRL&RAMP1 CRE Luc Reporter HEK293 Cells (C1).
Figure 3. Inhibtion of αCGRP/βCGRP induced Reporter Activity by CGRP Neutralizing Antibodies in CALCRL&RAMP1 CRE-Luc HEK293(C1).
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