目錄:上海華雅思創(chuàng)生物科技有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>細(xì)胞分離>> 25-072-CVCorning LSM 淋巴細(xì)胞分離培養(yǎng)基
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產(chǎn)品名稱:Corning LSM 淋巴細(xì)胞分離培養(yǎng)基
產(chǎn)品貨號: 25-072-CV
產(chǎn)品規(guī)格:500 ml
產(chǎn)品品牌:Corning
產(chǎn)品簡介:
corning 淋巴細(xì)胞分離液(LSM )設(shè)計用于在體外從稀釋的全血中分商淋巴細(xì)胞,是一種無菌等滲的聚蔗糖和泛影葡胺溶液。LSM為無菌過濾溶液,含有96.22 g/L泛影suan和61.36 g/L聚蔗糖400,在20攝氏度條件下,點度低,密度為1.077-1.080 g/ml。 溶液的滲透壓為290土20mOsm,pH為7.5士1.5。
產(chǎn)品原理
采用密度梯度商心法提取人外周淋巴細(xì)胞。低速商心30分鐘。根據(jù)密度的不同形成多層溶液。單核的細(xì)胞(淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞)和血小板處于 血漿與LSM的問隔條帶位置,紅細(xì)胞和粒細(xì)胞穿過LSM層,聚集在試管的底部。吸去血漿層,再回收淋巴細(xì)胞。多余的血小板,ISM和血漿可以通過后續(xù)的細(xì)胞清洗去除。
注意事項:
該分離液僅適用于人體的外周血液,不適用于動物。
使用該分離液時,需將待分離的血液用生理鹽水做等體積的稀釋。
分離液的保存應(yīng)置于無菌環(huán)境,并避光保存。
詳細(xì)操作步驟見產(chǎn)品說明書。
相關(guān)定義:
密度梯度離心
蔗糖多聚體,呈中性,平均分子量為400,000,當(dāng)密度為1.2g/ml仍未超出正常生理性滲透壓,也不穿過生物膜。紅細(xì)胞、粒細(xì)胞比重大,離心后沉于管底;淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞的比重小于或等于分層液比重,離心后漂浮于分層液的液面上,也可有少部分細(xì)胞懸浮在分層液中。吸取分層液液面的細(xì)胞,就可從外周血中分離到單個核細(xì)胞。
血細(xì)胞和密度
利用細(xì)胞的比重不同,可把血細(xì)胞分成不同的比重層次,外周血中紅細(xì)胞和多形核粒細(xì)胞比重較大,為1.092左右,而淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞比重較小,為1.075~1.090。配制比重介于1.075~1.090之間的等滲液,通常用聚蔗糖(商品名Ficoll)與泛影葡胺,用此比重的等滲液作密度梯度離心,使比重大于此比重的紅細(xì)胞、多形核粒細(xì)胞沉于管底,淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞浮于分層液與血液界面上,可用吸管吸出。這種方法分離出的淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞稱為單個核細(xì)胞。在干細(xì)胞采聚過程中,外周血或骨髓中的造血干細(xì)胞比重亦與淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞相同。因而,分離的單個核細(xì)胞中含有造血干細(xì)胞。
血液中的細(xì)胞成分。根據(jù)細(xì)胞質(zhì)中有無血紅蛋白,血細(xì)胞被分為紅細(xì)胞和白細(xì)胞。白細(xì)胞根據(jù)其胞質(zhì)中有無顆粒又分為有粒白細(xì)胞和無粒白細(xì)胞。有粒白細(xì)胞又根據(jù)其顆粒的染色特性分為嗜酸粒細(xì)胞、嗜堿粒細(xì)胞和中性粒細(xì)胞。無粒白細(xì)胞又根據(jù)其大小、核質(zhì)比例和染色性質(zhì)分為單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞。
PM400
高分子量蔗糖聚合物,由蔗糖與環(huán)氧氯丙烷共聚而成。分子被高度分支,高羥基含量導(dǎo)致水介質(zhì)中良好的可溶性。能促進(jìn)紅細(xì)胞凝集。
產(chǎn)品名稱:Corning LSM 淋巴細(xì)胞分離培養(yǎng)基
產(chǎn)品貨號: 25-072-CV
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