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供貨周期 | 兩周 | 規格 | 1Kit |
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貨號 | 13100-01 | 應用領域 | 生物產業 |
主要用途 | 細胞支原體污染PCR檢測試劑盒 |
細胞支原體污染PCR檢測試劑盒
產地:美國Southern Biotech Associates,Inc. (SBA)
產品信息:
中文名稱 | 英文名稱 | 貨號 | 規格 |
支原體PCR檢測試劑盒 | Mycoplasma Detection Kit | 13100-01 | 50T |
產品特點:
用于特異性檢測細胞培養液中支原體的污染
用于擴增支原體基因組中16S rRNA編碼區
特殊的引物設計擴增用于覆蓋支原體的三大類(Mycoplasma,Acholeplasma and Ureaplasma),因此可檢測超過95%的潛在的細胞污染。
檢測方法簡單,3小時內出結果。
檢測靈敏度高:可檢測到100ul細胞上清液中2-5毫微微克的支原體DNA。
特異性高,只擴增細胞培養液中支原體DNA,而真核細胞和細菌的DNA被擴增。
試劑盒帶有陽性對照用于驗證PCR體系的穩定性。
試劑盒內帶有內參對照,用于排除PCR抑制劑引起的假陰性。
試劑盒用于擴增的支原體種屬及對應PCR產物對照片段
支原體種屬 | PCR產物片段(bp) |
A.laidlawii | 611 |
M.arginini | 448 |
M.arthritidis | 486 |
M.bovis | 605 |
M.cloacale | 459 |
M.falconis | 458 |
M.faucium | 479 |
M.fermentans | 579 |
M.genitalium | 464 |
M.hominis | 448 |
M.hyorhinis | 525 |
M.hyosynoviae | 471 |
M.opalescents | 573 |
M.orale | 503 |
M.pirum | 533 |
M.pneumonia | 493 |
M.salivarium | 482 |
M.synoviae | 572 |
U.urealyticum | 558 |
結果分析:
細胞如被支原體污染,可擴增到448-611bp一條或多個條帶
樣本中包含內參的DNA將會擴增出270bp的PCR片段(見圖,泳道7),該擴增表明實驗系統可靠性。
如在一些樣品中擴增不到內參(270bp),這種情況下可設置陰性對照(樣本為水),可擴增到270bp的條帶。
如果樣品中含有PCR的抑制劑,可通過DNA提取去除。
如果細胞發生嚴重的支原體污染,448-611bp擴增產物將聚集或270bp的內參將消除(見圖,泳道6)
低于100bp的低濃度片段,表明是二聚體或非特異性片段,而非陽性結果,這種情況不影響檢測結果的精度。
檢測結果示例:
Lane1:大腸桿菌基因組擴增結果 Lane2:雜交瘤細胞DNA擴增結果
Lane3:陰性對照(水) Lane4:陽性對照
Lane5:抑制劑樣本 Lane6:嚴重支原體污染的細胞
Lane7:輕度支原體污染的細胞 Lane8:100bp DNA ladder
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