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小鼠皮質酮/腎上腺酮(CORT)ELISA Kit
檢測原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用小鼠皮質酮/腎上腺酮(CORT)抗體包被于酶標板上,實驗時標本或標準品中的CORT會與包被抗體結合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠CORT抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素。小鼠CORT抗體與結合在包被抗體上的小鼠皮質酮/腎上腺酮(CORT)ELISA Kit結合、生物素與親和素特異性結合而形成免疫復合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物,TMB在辣根過氧化物酶的催化下現藍色,加終止液后變黃。用酶標儀在450nm波長處測OD值,小鼠皮質酮/腎上腺酮(CORT)ELISA Kit濃度與OD450值之間呈正比,通過繪制標準曲線求出標本中小鼠內皮抑素(ES)酶聯免疫吸附測定試劑盒的濃度。
標本收集:
血清:全血標本于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,收集血液的試管應為一次性的無熱原,無內毒素試管。
血漿:抗凝劑推薦使用EDTA,標本采集后30分鐘內于1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測。避免使用溶血,高血脂標本。
其它生物標本:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測
標本應清澈透明,懸浮物應離心去除。
標本收集后若不及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃/-80℃電冰箱內,避免反復凍融,6個月內進行檢測,4℃保存的應在1周內進行檢測。
如果樣本中檢測物濃度高于標準品zui高值,請根據實際情況,做適當倍數稀釋(建議先做預實驗,以確定稀釋倍數)。
試驗所需自備物品:
酶標儀(450nm波長濾光片)
高精度移液器,EP管及一次性吸頭:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL
37℃恒溫箱, 雙蒸水或去離子水
吸水紙
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