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小鼠血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒
  • 小鼠血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒
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貨物所在地:上海上海市

地: 歐洲|美國|國產

更新時間:2024-08-22 09:29:02

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所有產品僅供科研使用,不能用于食用和醫療等

 

Chinese Name/中文名

小鼠血小板活化因子(PAF)ELISA Kit

English Name/英文名

Mouse plaet activating factor,PAF ELISA KIT 

Catalog Number/目錄號

 

Organism/種屬

小鼠

Packing/規格

96T/Kit(8*12strips)/ 48T/Kit(8*6strips)

Detection Range/檢測范圍

0.31-20ng/mL

Sensitivity/靈敏度

0.19ng/mL

Method/檢測方法

Sandwich-ELISA/雙抗體夾心ELISA

Sample Type/樣品類型

Serum, Plasma, Other biological fluids/血清、血漿等其它生物樣品

Other Names/其他名稱

 

小鼠血小板活化因子(PAF)ELISA Kit

問題1:如果我們檢測的樣本是組織樣本,請問應該選用什么來組織勻漿,濃度是多少?
答:一般我們試劑盒的組織勻漿,都是按照10%進行勻漿,即1g組織加9ml的勻漿液,勻漿液可以選取sheng理鹽水,也可以選取PBS,但*是PBS,PH=7.2-7.4,濃度為0.01mol.
問題2:請問我訂購了你們的試劑盒,但是樣本是分批次收集的,我可以分批次實驗嗎。
答:可以的,我們的試劑盒橫條是可拆卸的,試劑盒使用之后放到2-8度冰箱保存,下次可以繼續使用,但是建議是拆封之后一個月內用完。
問題3:請問各種標本的處理方式,你可以發給我一下嗎?
答:當然可以。標本要求如下:
在收集樣本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天就進行檢測的樣本,及時儲存在4℃備用。對于隔天再檢測的樣本,及時分裝后凍存在-20℃備用,有條件的,-70℃凍存備用。標本應避免反復凍融。
液體類標本: 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2.血漿:應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4.細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
5.培養細胞:檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
6.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑,用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
7.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
8.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

組成及試劑配制 

1.酶聯板:兩塊(96孔)

2.標準品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為1,600 pg/ml,將其稀釋為400 pg/ml后,再做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別稀釋成400 pg/ml,200 pg/ml,100 pg/ml,50 pg/ml,25 pg/ml,12.5 pg/ml,6.25 pg/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml,臨用前15分鐘內配制。如配制200 pg/ml標準品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 400 pg/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3.樣品稀釋液:1×20ml。

4.檢測稀釋液A:1×10ml。

5.檢測稀釋液B:1×10ml。

6.檢測溶液A:1×120μl(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(100μl/孔),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl檢測溶液A加990μl檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制。

7.檢測溶液B:1×120μl/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。

8.底物溶液:1×10ml/瓶。

9.濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10.終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

11.覆膜:5張

12.使用說明書:1份

自備物品

1.酶標儀(建議參考儀器使用說明提前預熱)

2.微量加液器及吸頭,EP管

3.蒸餾水或去離子水,全新濾紙

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