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當(dāng)前位置:> 供求商機(jī)> 小鼠Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA試劑盒
所有產(chǎn)品僅供科研使用,不能用于食用和醫(yī)療等
Chinese Name/中文名 | 小鼠Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA Kit |
English Name/英文名 | Mouse Collagen Type Ⅱ,Col Ⅱ ELISA Kit |
Catalog Number/目錄號(hào) |
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Organism/種屬 | 小鼠 |
Packing/規(guī)格 | 96T/Kit(8*12strips)/ 48T/Kit(8*6strips) |
Detection Range/檢測范圍 | 0.31-20ng/mL |
Sensitivity/靈敏度 | 0.19ng/mL |
Method/檢測方法 | Sandwich-ELISA/雙抗體夾心ELISA |
Sample Type/樣品類型 | Serum, Plasma, Other biological fluids/血清、血漿等其它生物樣品 |
Other Names/其他名稱 |
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小鼠Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA Kit
問題1:如果我們檢測的樣本是組織樣本,請(qǐng)問應(yīng)該選用什么來組織勻漿,濃度是多少? | |||||||
答:一般我們?cè)噭┖械慕M織勻漿,都是按照10%進(jìn)行勻漿,即1g組織加9ml的勻漿液,勻漿液可以選取sheng理鹽水,也可以選取PBS,但*是PBS,PH=7.2-7.4,濃度為0.01mol. | |||||||
問題2:請(qǐng)問我訂購了你們的試劑盒,但是樣本是分批次收集的,我可以分批次實(shí)驗(yàn)嗎。 | |||||||
答:可以的,我們的試劑盒橫條是可拆卸的,試劑盒使用之后放到2-8度冰箱保存,下次可以繼續(xù)使用,但是建議是拆封之后一個(gè)月內(nèi)用完。 | |||||||
問題3:請(qǐng)問各種標(biāo)本的處理方式,你可以發(fā)給我一下嗎? | |||||||
答:當(dāng)然可以。標(biāo)本要求如下: | |||||||
在收集樣本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測的樣本,及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆谩?duì)于隔天再檢測的樣本,及時(shí)分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆茫袟l件的,-70℃凍存?zhèn)溆谩?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。 | |||||||
液體類標(biāo)本: 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。 | |||||||
1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。 | |||||||
2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。 | |||||||
3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。 | |||||||
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。 | |||||||
5.培養(yǎng)細(xì)胞:檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。 | |||||||
6.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。 | |||||||
7.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融. | |||||||
8.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。 |
組成及試劑配制
1.酶聯(lián)板:兩塊(96孔)
2.標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為1,600 pg/ml,將其稀釋為400 pg/ml后,再做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別稀釋成400 pg/ml,200 pg/ml,100 pg/ml,50 pg/ml,25 pg/ml,12.5 pg/ml,6.25 pg/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 pg/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。如配制200 pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 400 pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3.樣品稀釋液:1×20ml。
4.檢測稀釋液A:1×10ml。
5.檢測稀釋液B:1×10ml。
6.檢測溶液A:1×120μl(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100μl/孔),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl檢測溶液A加990μl檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
7.檢測溶液B:1×120μl/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8.底物溶液:1×10ml/瓶。
9.濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10.終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
11.覆膜:5張
12.使用說明書:1份
自備物品
1.酶標(biāo)儀(建議參考儀器使用說明提前預(yù)熱)
2.微量加液器及吸頭,EP管
3.蒸餾水或去離子水,全新濾紙
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