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人生長因子(HGH)ELISA試劑盒
  • 人生長因子(HGH)ELISA試劑盒
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貨物所在地:上海上海市

地: 進口/國產

更新時間:2024-08-22 09:29:16

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所有產品僅供科研使用,不能用于食用和醫療等

人生長因子(HGH)ELISA Kit試劑組成

 

1. 預包被板

48T/96T;

 

6. 樣本稀釋液(5號液)

1支;

2. 酶結合物(1號液)

1支;

 

7. 終止液(6號液)

1支;

3. 洗滌液(2號液)

1支;

 

8. 陽性對照品

1支;

4. 底物(3號液)

1支;

 

9. 陰性對照品

1支;

5. 顯色劑(4號液)

1支;

 

10.使用說明書

1份;

 

問題1:如果我們檢測的樣本是組織樣本,請問應該選用什么來組織勻漿,濃度是多少?
答:一般我們試劑盒的組織勻漿,都是按照10%進行勻漿,即1g組織加9ml的勻漿液,勻漿液可以選取sheng理鹽水,也可以選取PBS,但*是PBS,PH=7.2-7.4,濃度為0.01mol.
問題2:請問我訂購了你們的試劑盒,但是樣本是分批次收集的,我可以分批次實驗嗎。
答:可以的,我們的試劑盒橫條是可拆卸的,試劑盒使用之后放到2-8度冰箱保存,下次可以繼續使用,但是建議是拆封之后一個月內用完。
問題3:請問各種標本的處理方式,你可以發給我一下嗎?
答:當然可以。標本要求如下:
在收集樣本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天就進行檢測的樣本,及時儲存在4℃備用。對于隔天再檢測的樣本,及時分裝后凍存在-20℃備用,有條件的,-70℃凍存備用。標本應避免反復凍融。
液體類標本: 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2.血漿:應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4.細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
5.培養細胞:檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
6.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑,用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
7.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
8.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

人生長因子(HGH)ELISA Kit操作程序

  • 加樣反應:取出所需量的反應板條,每孔加樣本稀釋液(5號液)2滴,再分別加入待檢的血清樣本10ul,混勻。同時設陰性、陽性及空白對照各一孔;陰性、陽性對照不用再稀釋,直接加樣100ul即可,空白對照孔僅加入樣本稀釋液(5號液)2滴。37℃避光反應30分鐘后甩去孔內液體,每孔加洗滌液(2號液)1滴,立即用蒸餾水注滿,靜置30秒后甩去,再直接用蒸餾水洗滌四次,甩去,拍干。
  • 加酶反應:除空白對照孔外其余每孔加酶結合物(1號液)2滴,37℃避光反應30分鐘后甩去孔內液體,如上洗滌,拍干。
  • 顯色反應:加底物(3號液)和顯色劑(4號液)各1滴,混勻,37℃下避光顯色10分鐘。加終止液(6號液)1滴,混勻,終止反應(加終止液后藍色會變為黃色)并判讀結果。

人生長因子(HGH)ELISA Kit結果判斷

  • 肉眼觀察:陰性對照接近無色,陽性對照呈明顯黃色,表示試驗有效。待檢孔接近無色表示該標本為陰性,待檢孔呈明顯黃色表示該標本為陽性。
  • 儀器判斷:以空白對照調零用酶標儀于450nm(620nm作參比波長)讀取O.D值,待檢孔O.D值大于陰性對照2.1倍者為陽性。當陰性對照O.D值低于0.05時按0.05計算。

人生長因子(HGH)ELISA Kit注意事項

  • 試劑盒在2-8℃下保存,每次取出時先平衡至室溫后使用。滴瓶每次用后一定要將蓋擰緊,各瓶蓋之間切不可混用。各試劑盒之間不可混用。
  • 如陰陽對照為凍干品時,請先按標示加入蒸餾水溶解后使用。
  • 洗滌時將蒸餾水加滿孔內,每次停放三十秒鐘,甩去孔內液體。禁用自來水等其它水源。
  • 為提高試驗的可比性,建議使用儀器判讀結果。
  • 如有條件,使用水浴箱孵育。

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