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內毒素清除瓊脂糖凝膠
英文名稱:Endotoxin Removal Reagent Berpharose Fast Flow
貨號:B2820
規(guī)格:10ml
1.產品介紹
本公司生產的內毒素清除瓊脂糖凝膠FF,可以特異去除病毒,核酸和蛋白等樣品中的內毒素。本產品具有剛性好,特異性強,載量高,穩(wěn)定性好,樣品回收率高等特點。
本產品直接加入到樣品中進行內毒素清除,不必裝柱,使用方便,有效,利于放大生產,此外在使用過程中配基不脫落,安全可靠,可以重復使用。 處理后的樣品內毒素含量可以小于0.1EU/mg
2.規(guī)格
10ml、25ml、100ml、500ml、1L 使用方法
緩沖液配制:
再生液:1%脫氧膽酸鈉、20 mM磷酸鹽緩沖液、pH7.0
(稱取Na2HPO4.12H2O 2.43g、NaH2PO4.2H2O 0.25g、NaCl 4.5g、脫氧膽酸鈉
5.0g、加注射用水溶解,定容至500ml)
平衡液:20 mM磷酸鹽緩沖液、pH7.0
(稱取Na2HPO4.12H2O 2.43g、NaH2PO4.2H2O 0.25g、NaCl 4.5g、加注射用水
溶解,定容至500ml)
實驗步驟:
再生:用1-2倍填料體積的再生液抽洗,再用3-5倍填料體積的再生液將凝膠充分混勻,
保持 10min。
平衡:用5-10倍填料體積的平衡液,對填料進行平衡,重復5-10次。
上樣:(1)直接混合法:
①根據(jù)樣品溶液中內毒素的含量加入一定量經上述預處理好的填料,于三角瓶中 4℃、150rpm振蕩,直至充分去除內毒素。
② 將以上樣品無菌過濾,測內毒素含量。
(2)過柱法:
①將經上述預處理好的填料裝填到色譜柱中
②流速控制在0.25ml/min左右上樣,把流穿的樣品液,再次加入到上樣液中,循環(huán)上樣,直至充分去除內毒素。
注:由于有時候內毒素和樣品的結合,需要較長時間去除,因此通常情況下直接混勻法優(yōu)于過柱法。
5.注意事項:
(1)各操作中樣品、填料接觸到的全部儀器設備耗材均應為無熱源(無內毒素)。
(2)0.2µm 濾膜要用 0.1M NaOH 浸泡過夜后,121℃高壓滅菌30min。
(3)脫氧膽酸鈉溶液低溫容易成胨狀,使用時溫度可以到30℃,避免流不動堵柱子或漏斗。
(4)該親和填料每次使用前都需進行填料再生步驟。
(5)配制緩沖液要用無內毒素的注射級用水,配制過程要防止引入內毒素。
(6)適當延長填料與樣品溶液的處理時間可以加大內毒素的吸附量。
(7)如需使用磁力攪拌要注意轉速別太快,避免填料顆粒破碎。
(8)樣品如果本身是帶負性電荷,為增加樣品回收率,樣品中可以加≤0.2M NaCl。
(9)樣品 pH7-9范圍內。
(10)樣品內毒素太高,超過填料處理量,需要稀釋樣品找到內毒素的范圍,和經去除后內毒素的范圍對照,就可以知道效果,如果一次去除不完-全,可以重復,直到合格為止。
(11)本產品保存條件為20%乙醇,4~8℃。
(12)2-25℃,常壓,避光運輸。
(13)僅供科研實驗使用。
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