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產品名稱: | 人免疫球蛋白G(IgG) ELISA試劑盒 |
樣品形式: | 血清/血漿/細胞培養上清等(具體情況請咨詢) |
有效期: | 六個月 |
保存與運輸: | 2到8℃ |
供貨商: | 上海信帆生物科技有限公司 |
人免疫球蛋白G(IgG) ELISA試劑盒 | |
操作步驟 | |
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。 | |
8 nmol/L 5 號標準品 150μl 的原倍標準品加入150μl 標準品稀釋液 | |
4 nmol/L 4 號標準品 150μl 的5 號標準品加入150μl 標準品稀釋液 | |
2 nmol/L 3 號標準品 150μl 的4 號標準品加入150μl 標準品稀釋液 | |
1 nmol/L 2 號標準品 150μl 的3 號標準品加入150μl 標準品稀釋液 | |
0.5 nmol/L 1 號標準品 150μl 的2 號標準品加入150μl 標準品稀釋液 | |
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、 | |
待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl, | |
然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡 | |
量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。 | |
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。 | |
4. 配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用 | |
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒后棄去,如此重復5 次,拍干。 | |
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 | |
7. 溫育:操作同3。 | |
8. 洗滌:操作同5。 | |
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色 | |
10 分鐘. | |
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。 | |
11. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止液后15 分鐘以內進行。 | |
人免疫球蛋白G(IgG) ELISA試劑盒 | |
操作程序總結: | |
計算 | |
以標準物的濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的 | |
OD 值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD 值計算出標 | |
準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD 值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數, | |
即為樣品的實際濃度。 | |
注意事項 | |
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未 | |
用完,板條應裝入密封袋中保存。 | |
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。 | |
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間 | |
控制在5 分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。 | |
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD 值 | |
大于標準品孔*孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)后再測定,計 | |
算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。 | |
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 | |
6.底物請避光保存。 | |
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準. | |
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。 | |
9.本試劑不同批號組分不得混用。 | |
上海信帆銷售ELISA試劑盒,*、酶聯免疫技術服務。 | |
人免疫球蛋白G(IgG) ELISA試劑盒 |
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