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產品名稱:小鼠心肌肌鈣蛋白T(cTn-T)檢測試劑盒
英文名稱:Mouse cTn-T ELISA Kit
產品貨號:XFM21300
規格:48T/96T
檢測范圍:25 pg/mL – 800 pg/mL
儲存條件:2-8℃
有效期:6個月
用途:本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中小鼠心肌肌鈣蛋白T(cTn-T)的含量。
本產品僅供科研實驗用,不做其他用途。
背景介紹: 心肌肌鈣蛋白T(TNNT2或cTn-T)是一種35.9 kDa的蛋白質,由298個氨基酸組成。心肌Tn-T是心肌肌動蛋白細絲上三個肌鈣蛋白亞單位(cTn-T、肌鈣蛋白I(TnI)、肌鈣蛋白C(TnC))中最大的一個。作為肌鈣蛋白復合物的一部分,它的功能是調節肌肉的收縮。Tn-T的N端區域與肌動蛋白緊密結合,在強肌球蛋白橫橋結合和發力時與Tm和肌動蛋白一起移動。
檢測原理:
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被小鼠心肌肌鈣蛋白T(cTn-T)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹-底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠心肌肌鈣蛋白T(cTn-T)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
樣品收集、處理及保存方法
以下只是列出樣品采集的一般指南。所有樣本采集過程中,不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3. 細胞培養物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
4. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織-剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
注:標本溶血會影響最后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
注意事項:
1、產品僅供科研實驗使用,請勿用于食品、化妝品、臨床醫療等其它用途。
2、使用時,請穿戴好實驗服、防護面罩、一次性實驗手套等,做好實驗防護,嚴禁直接接觸。攝入有害,嚴禁入口。
3、剩余產品請勿隨意丟棄,請按照相關生物化學廢棄物的處理規定,進行處理。
4、請按照保存要求妥善保存,使用后請密封避光保存。
小鼠心肌肌鈣蛋白T(cTn-T)檢測試劑盒
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