Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)?elisa試劑盒的小知識
I型前膠原羧基端前肽(carboxyterrninal propeptide of type Ipmcollagen, PICP)是骨組織中惟一的膠原,占骨基質的90%以上。血清中I型前膠原羧基端前肽的水平是反映成骨細胞活動和骨形成以及反映I型膠原合成速率的特異指標。它可以被肝臟吸收,通過上皮細胞甘露糖受體結合而被清除,所以易受肝功能的影響。
I型前膠原羧基端前肽的正常值:50-200ug/L
測定I型前膠原羧基端前肽的研究意義表現在I型前膠原羧基端前肽增高:見于兒童發育期、妊娠zui后3個月、骨腫瘤,特別是前列腺癌骨轉移、畸形性骨炎、酒精性肝炎和肺纖維化等。I型前膠原羧基端前肽降低:見于絕經期后骨質疏松樣本經雌激素治療6個月后可降低30%,但其降低的機制尚不清楚。
Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)?elisa試劑盒的小知識
實驗開始前,請提前配置好所有試劑,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。
為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測。
1、操作簡單、快速。所有操作步驟,都有圖譜示意,讓你簡單明了,不必為研究操作步驟而耽擱時間。
2.靈敏度高。 酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導大量的催化反應 ,產生可供觀察的顯色反應現象。我們的試劑盒實現了在ug、ng、pg水平上對其進行定量。
3.特異性強。特異性來自抗體或抗原的選擇性。采用的*抗體抗原,保證的試劑盒品質。
4.性價比高,質量穩定。
5.樣品所需量少。
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