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新品特賣:HRP標(biāo)記小鼠抗兔IgG二抗等你來搶
上海信帆生物供應(yīng)HRP標(biāo)記小鼠抗兔IgG二抗,產(chǎn)品備有大量庫存現(xiàn)貨,質(zhì)量穩(wěn)定!
HRP標(biāo)記小鼠抗兔IgG二抗
mouse Anti-Rabbit IgG (γ-chain specific)
(peroxidase conjugate)
SIZE: 0.1ml
PRODUCT DESCRIPTION
Antiserum is developed in mouse using the rabbit IgG as the immunogen. The antibody is obtained
by affinity purified technique, which remove essentially all mouse proteins, except the specific antibody
for rabbit IgG. mouse anti- rabbit IgG is conjugated to peroxidase by means of a method described by
Wilson MB and Nakane PK..
The conjugate is specific for rabbit IgG when tested against rabbit IgA, IgG, IgM, Bence Jones kappa
and lambda myeloma proteins by ELISA.
CONTENTS 1mg/ml specific antibody; 0.01M PBS(pH7.4).
APPLICATION Direct ELISA: 1:5000-10000(TMB detection)
Western Blotting: 1:500-3000(DAB detection)
Western Blotting: 1:3000-10000(Enhanced chemiluminescent detection )
Optimal working dilutions must be determined by end user.
STORAGE Store at 4℃ for frequent use; at -20℃for at least one year.
REFERENCE
Wilson MB and Nakane PK. In Immunofluorescence and Related Staining Techniques, Elsevier/North
Holland Biomedical Press, Amsterdam, P215(1978).
Boster offers a comprehensive line of immunohistological staining kits(named SABC),including
FITC, Cy3,peroxidase and alkaline phosphatase.We recommend following the primary antibody by
SABC kits in immunohistological staining procedure. Ask for further informations.
如何正確選擇二抗?
如何選擇正確的二抗?
以下指南將幫助您選擇適合該應(yīng)用的二抗。
常見問題
1.一抗的宿主物種是什么?
2.需要了解哪些有關(guān)一抗同型的內(nèi)容?
3.需要酶學(xué)或熒光檢測嗎?
4.是否需要預(yù)吸附的二抗?
5.是否需要親和純化的抗體或 IgG 片段?
6.有必要使用 F(ab) 或 F(ab')2 片段抗體嗎?
7.是否需要抗 IgG 重鏈和輕鏈、抗輕鏈或抗 F(ab')2二抗?
1. 一抗的宿主物種是什么?二抗指向一抗的物種。如果使用來源于兔的一抗,則需要來源于除兔以外的其它物種的抗兔二抗。例如山羊多克隆抗兔IgG - H&L (HRP) 二抗 (ab6721) 可以檢測兔多克隆抗 Ki67 一抗 (ab15580)。
2. 需要了解哪些有關(guān)一抗同型的內(nèi)容?二抗必須指向一抗同型。
多克隆一抗通常來源于兔、山羊、綿羊或驢,并且是IgG 同型。二抗通常為抗 IgG 重鏈和輕鏈的抗體。單克隆一抗通常來源于小鼠、兔和大鼠。例如,如果單克隆一抗為小鼠 IgG1,則 需要抗小鼠IgG 或特異性較低的 F(ab) 片段抗小鼠 IgG。人免疫球蛋白類、亞類、型和亞型:
類或同型:IgG (γ heavy chains), IgM (μ), IgA (α), IgE (ε), IgD (δ)
亞類: IgG1 (γ1 heavy chains), IgG2 (γ2), IgG3 (γ3), IgG4 (γ4); IgA1 (α1),
IgA2 (α2)
型:κ light chain, λ light chain
亞型: λ1, λ2, λ3, λ4
其它類型的反應(yīng):
多價(jià)抗體與所有免疫球蛋白類反應(yīng)
抗 Fc 或重鏈 (α, δ, ε, γ, and μ) 抗體僅與重鏈反應(yīng)
抗 F(ab) 或完整分子抗體與重鏈和輕鏈反應(yīng),而與免疫球蛋白類無關(guān)
由于所有免疫球蛋白類均使用相同的 κ 和 λ 輕鏈,因此抗輕鏈(κ 和 λ)抗體 與所有
免疫球蛋白類反應(yīng)
3. 需要酶學(xué)或熒光檢測嗎?偶聯(lián)類型是依賴于應(yīng)用的。
對于酶學(xué)和生物素檢測,例如,在 WB 或 ELISA 中,建議將二抗偶聯(lián)于 HRP, AP 或 生物素。不論抗體宿主物種是什麼,抗生物素蛋白和鏈霉親和素與生物素的結(jié)合 作用均很強(qiáng),并且均能使信號放大。如果使用了激光,例如,在流式細(xì)胞術(shù)、ICC/IF 或 IHC 中使用時(shí),則建議將二抗偶 聯(lián)于熒光染料進(jìn)行熒光檢測。訪問我們 熒光染料指南,為您的實(shí)驗(yàn)選擇染料。
Learn more about the 查看更多關(guān)于使用DyLight ?熒光染料的特性與優(yōu)點(diǎn).
4. 是否需要預(yù)吸附的二抗?對于富含免疫球蛋白的組織和細(xì)胞,通常推薦使用預(yù)吸附血清的二抗于蛋白質(zhì)印 跡應(yīng)用。預(yù)吸附的二抗與內(nèi)源免疫球蛋白發(fā)生相互作用的可能性較低,因此可降 低非特異性背景。二抗進(jìn)行預(yù)吸附時(shí),預(yù)吸附樣品應(yīng)來源于與檢測樣品相同的物 種。例如,在人組織中檢測時(shí),將需要人預(yù)吸附抗體。
5. 是否需要親和純化的抗體或 IgG 片段?使用親和純化的抗體或 IgG 片段的優(yōu)點(diǎn)將取決于預(yù)期的結(jié)合類型。親和純化的抗 體的非特異性結(jié)合量低,而 IgG 片段包含高親和抗體。事實(shí)上,在親和純化中, 高親和力抗體保持固定在基質(zhì)上并且不能被洗脫。
6.有必要使用 F(ab) 或 F(ab')2片段抗體嗎?F(ab) ) 和 F(ab')2片段抗體消除了抗體 Fc
部分與細(xì)胞(如巨噬細(xì)胞、樹突細(xì)胞、 中性粒細(xì)胞、NK 細(xì)胞和 B 細(xì)胞)上 Fc 受體之間的非特異性結(jié)合,并且由于它 們尺寸較小而能夠更有效地滲透組織。由于片段抗體不具有 Fc部分,因此它們 不干擾抗 Fc 介導(dǎo)的抗體檢測。
7. 是否需要抗 IgG 重鏈和輕鏈、抗輕鏈或抗 F(ab')2 二抗?我們以不同形式提供二抗:
抗 IgG 重鏈和輕鏈的抗體同時(shí)與 IgG 亞類的重鏈和輕鏈反應(yīng)
抗輕鏈抗體與在所有免疫球蛋白類中均相同的一抗輕鏈反應(yīng)
抗 F(ab')2 二抗與一抗的 F(ab')2 部分反應(yīng)
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