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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 醫療衛生,制藥 |
|---|
產品介紹
白細胞介素 12(IL-12)，也稱為自然殺傷細胞刺激因子(NKSF)或細胞毒性淋巴細胞成熟因子(CLMF)，是一種異二聚體多效性細胞因子，由 40 kDa(p40)亞基和 35 kDa(p35)亞基組成。IL-12 p40亞基由IL-23共享，IL-23是另一種異二聚體細胞因子，具有與IL-12相似和不同的生物活性。IL-12由巨噬細胞和B細胞產生，已被證明對T細胞和自然殺傷(NK)細胞有多種作用。雖然小鼠IL-12在人和小鼠細胞上都有活性，但人IL-12在小鼠細胞上沒有活性。
翌圣Human IL-12 p70 ELISA(酶聯免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯免疫吸附測定試劑盒，用于定量測定血清、血漿和細胞培養上清中的人白介素12 p70(Human IL-12 p70)。特異性抗人白介素12 p70抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本，經過孵育，樣本中存在的人白介素12 p70與固相抗體結合。洗滌去除未結合的物質后，加入檢測抗體（生/物/素標記）孵育結合，經洗滌，再加入酶結合物(HRP標記鏈霉親和素)孵育結合。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中人白介素12 p70的濃度成正比。加入終止液終止反應，在450 nm 主波長，570nm次波長測定吸光度值。
產品信息
貨號 | 97025ES48 / 97025ES96 |
規格 | 48 T / 96 T |
檢測范圍 | 31.25-2000 pg/mL |
檢測方法 | 雙抗夾心法 |
檢測物種 | 人 |
檢測時長 | 5 小時 |
靈敏度 | 1.954 pg/mL |
稀釋線性 | 81 - 127% |
回收率 | 70 - 107% |
板內差 | 5.0% |
板間差 | 8.4% |
實驗數據
標曲數據
數據擬合繪制標準曲線，生成的標曲用于實驗數據分析。
標準曲線圖
濃度（pg/mL） | 顯色值 | 平均值 | 校準值 | ||
2000 | 2.147 | 2.016 | 2.082 | 2.039 | |
1000 | 1.311 | 1.208 | 1.260 | 1.217 | |
500 | 0.732 | 0.651 | 0.691 | 0.649 | |
250 | 0.441 | 0.424 | 0.433 | 0.391 | |
125 | 0.220 | 0.218 | 0.219 | 0.177 | |
62.5 | 0.129 | 0.128 | 0.129 | 0.086 | |
31.3 | 0.089 | 0.086 | 0.087 | 0.045 | |
0 | 0.043 | 0.042 | 0.042 | / | |
靈敏度檢測
人白介素12 p70的 檢測限為1.954 pg/mL，通過使用重復檢測20次零孔OD值的均值與標準差計算得出。
精密度檢測
酶標板內精密度
3個已知濃度的樣本酶標板內重復測定20次，評估酶標板內的精密度。
酶標板間精密度
3個已知濃度的樣本酶標板間重復檢測36次，評估酶標板間的精密度。
項目 | 板內精密度 | 板間精密度 | ||||
樣本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
20 | 20 | 20 | 36 | 36 | 36 | |
平均值 | 1393.2 | 304.7 | 69.2 | 1247.7 | 304.6 | 68.2 |
標準差 | 68.3 | 14.0 | 3.8 | 130.8 | 30.5 | 3.1 |
變異系數（%） | 4.9 | 4.6 | 5.4 | 10.5 | 10.0 | 4.6 |
回收率檢測
通過不同水平的人白介素12 p70添加于樣本中來測定回收率，其回收率如下:
樣本類型 | 平均回收率(%) | 范圍（%） |
血清 | 88.3 | 71.8-104.0 |
血漿 | 82.3 | 70.5-95.5 |
細胞培養上清 | 95.5 | 79.7-107.6 |
稀釋線性檢測
血清稀釋比例 | 平均期望值(%) | 范圍（%） |
1:02 | 87.7 | 85.2-92.0 |
1:04 | 93.8 | 89.3-99.5 |
1:08 | 99.7 | 89.8-109.2 |
1:16 | 102.8 | 86.5-117.8 |
血漿稀釋比例 | 平均期望值(%) | 范圍（%） |
1:02 | 91.2 | 87.8-97.2 |
1:04 | 106.2 | 102.2-112.5 |
1:08 | 115.2 | 113.7-116.9 |
1:16 | 123.0 | 116.1-127.1 |
細胞培養上清稀釋比例 | 平均期望值(%) | 范圍（%） |
1:02 | 89.9 | 81.6-103.3 |
1:04 | 111.2 | 98.5-118.5 |
1:08 | 114.8 | 108.3-121.6 |
1:16 | 117.8 | 111.9-123.9 |
樣本值
應用本試劑盒，檢測若干健康志愿者的樣本，志愿者的用藥史不詳。
樣本類型 | 樣本數目 | 平均值（pg/mL） | 樣本值（pg/mL） |
血清 | n.d. | n.d. | n.d. |
EDTA血漿 | n.d. | n.d. | n.d. |
肝//素血漿 | n.d.-152.3 | 32 | n.d.-152.3 |
枸//櫞//酸鈉血漿 | n.d. | n.d. | n.d. |
細胞培養上清 | n.d. | n.d. | n.d. |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內得31.25 pg/mL
測定特異性
本試劑盒識別天然和重組//人/白/介素12 p70。在50 ng/mL條件下制備的下述因子進行了特異性的評估，沒有觀察到明顯的交叉反應和干擾影響。
Recombinant human: | Recombinant mouse: |
G-CSF | IL-6 |
GP130 | IL-12/IL-23 p40 |
IL-6 | IL-12 p70 |
IL-6 Rα | IL-23 |
IL-12 p35 | IL-27 |
IL-12/IL-23 p40 | |
IL-12 Rβ1 | |
IL-12 Rβ2 | |
IL-23 | |
IL-27 |
檢測簡圖
疑問解答
問題 | 造成原因 | 解決方法 |
標曲不好 | 移液量不準確 | 檢查移液器，按時校準，仔細操作，充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
稀釋方法不恰當 | ||
顯色值偏低 | 孵育時間太短 | 給予足夠的孵育時間，樣本和溶解的標準品隔夜后更換。 |
移液量不足或稀釋不當 | 校準移液器和規范操作 | |
CV偏高 | 酶標板清洗不當 | 使用正確的洗滌工序；如果使用洗板機，檢查所有的端口是否堵塞。 |
受污染的洗液 | 準備新鮮洗液 | |
靈敏度較低 | 試劑盒儲存不當 | 按照產品組分表進行保存。 |
