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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 1000 T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 18461ES60 | 應用領域 | 醫療衛生,生物產業,制藥 |
產品介紹
產品信息
產品名稱
產品編號
規格
價格（元）
MolPure® Magnetic Residual DNA Sample Preparation Kit
磁珠法殘留DNA樣本前處理試劑盒（瓶裝）
18461ES25
25 T
425.00
18461ES60
100T
1,395.00
產品描述
MolPure® Magnetic Residual DNA Sample Preparation Kit適用于生物制品樣本中殘留DNA檢測的前處理。采用*的磁珠和精心優化的緩沖體系，可最大限度的分離純化樣本中的微量宿主細胞殘留DNA。
該前處理試劑盒可與多種宿主細胞DNA殘留（qPCR法）檢測試劑盒配合使用，包括CHO宿主細胞殘留DNA檢測試劑盒（Cat#41301）、HEK293宿主細胞殘留DNA檢測試劑盒（Cat#41302）、Vero宿主細胞殘留DNA檢測試劑盒（Cat#41303）和E.coli殘留DNA檢測試劑盒（Cat#41304）。
產品組分
類別
組分編號
組分名稱
產品編號/規格
18461ES25（25 T）
18461ES60（100 T）
Part I
18461-A
蛋白酶K（20 mg/mL）
0.5 mL/支×1支
1 mL/支×2支
Part Ⅱ
18461-B
磁珠懸浮液
0.5 mL/支×1支
1 mL/支×2支
18461-C
裂解液
2.5 mL/瓶×1瓶
10 mL/瓶×1瓶
18461-D
結合液
10 mL/瓶×1瓶
40 mL/瓶×1瓶
18461-E
洗滌液A*
6 mL/瓶×1瓶
（需加9 mL乙醇）
24 mL/瓶×1瓶
（需加36 mL乙醇）
18461-F
洗滌液B*
3 mL/瓶×1瓶
（需加12 mL乙醇）
12 mL/瓶×1瓶
（需加48 mL乙醇）
18461-G
洗脫液
2.5 mL/瓶×1瓶
10 mL/瓶×1瓶
Part Ⅲ
18461-H
糖原
225 μL/支×1支
900 μL/支×1支
18461-I
Poly A鉀鹽
150 μL/支×1支
600 μL/支×1支
運輸和保存方法
Part I組分室溫運輸，4℃可保存1年，長期保存于-20℃。
Part II組分室溫運輸，室溫保存，有效期1年。
Part Ⅲ 組分冰袋運輸，-20℃保存1年。
注意事項
1. 注意觀察常溫保存溶液是否有析出或渾濁（尤其冬季等室溫為低溫環境時），可37℃水浴至溶液澄清，避免影響使用效果。
2. 洗脫時可能存在磁珠殘留，吸取樣本時應盡量避免吸入磁珠。3. 處理樣本及加樣時，勤換槍頭，避免交叉污染。
4. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
5. 本產品僅作科研用途！
實驗前準備
1. 自備設備和試劑：磁性分離架、杭州奧盛Auto-Pure32A核酸提取儀或其他全自動化提取儀，水浴鍋或金屬浴，離心機，漩渦振蕩器，1.5 mL離心管，無水乙醇等。
2. 首使用前，在洗滌液A*和洗滌液B*瓶中加入標簽或說明書中注明體積的無水乙醇，充分混勻后使用，并做好標記。每次使用后將瓶蓋蓋緊，以保持瓶中的乙醇含量。一、手工提取操作方法
1. 樣本處理
a. 待測樣本為疫苗等本身含有較高的DNA含量的樣本，可用1×PBS（pH=7.4）對樣本進行適當比例稀釋后提取（對樣本進行稀釋是為了保證檢測的準確性，使樣本的檢測值在標準曲線線性范圍之內，通常可考慮進行100倍稀釋）。
b. 待測樣本為干粉的，可用ddH2O將樣本稀釋成10 mg/mL或者100 mg/mL后使用。
c. 待測樣本為復雜背景基質的，可根據需要進行加標回收實驗，以確定合適的樣本稀釋倍數。
2. 取100 μL樣本裝于1.5 mL離心管中，加入100 μL裂解液，10 μL蛋白酶K，渦旋混勻10 sec。
【注】：樣本蛋白濃度0-100 mg/mL，蛋白酶K用量為10 μL，樣本蛋白濃度100-200 mg/mL，蛋白酶K用量為20 μL。
3. 60℃孵育20 min。
4. 孵育完成后，加入400 μL結合液、9 μL糖原、6 μL Poly A鉀鹽渦旋混勻。
5. 加入20 μL磁珠，渦旋混勻后，放置10 min，每隔3 min渦旋混勻10 sec。
【注】：磁珠使用前需渦旋混勻，保證磁珠*重懸。在一次性加樣4-5次后，建議再次混勻后再行加樣。
6. 短暫離心后，將離心管置于磁力架上靜置1-2 min，待磁珠*吸附，小心吸出液體。
7. 加入500 μL洗滌液A（使用前請先檢查是否已加入無水乙醇），振蕩或渦旋混勻，確保磁珠分散，離心管壁無聚集磁珠。
8. 短暫離心后，將離心管置于磁力架上靜置1-2 min，待磁珠*吸附，小心吸取液體。
9. 加入500 μL洗滌液B（使用前請先檢查是否已加入無水乙醇），振蕩或渦旋混勻，確保磁珠分散，離心管壁無聚集磁珠。
10.短暫離心后，將離心管置于磁力架上靜置1-2 min，待磁珠*吸附，小心吸取液體。
11.為保證盡量吸出殘留液體，可將離心管快速離心10 sec后，置于磁力架上用10 μL移液器吸出殘留液體。
12.打開管蓋，室溫放置3 min直至乙醇*揮發。觀察到磁珠表面無反光或出現裂隙即表明乙醇已揮發*。
13.將離心管從磁力架上取下，加入50-100 μL 65℃預熱的洗脫液，振蕩混勻，短暫離心后，65℃孵育5 min，期間可振蕩混勻1次。
14.短暫離心后，將離心管放置于磁力架上靜置2 min，待磁珠*吸附，小心將DNA溶液轉移至新的離心管中，保存于-20℃，長期保存需放置于-80℃。
二、半自動化提取操作方法
配套自動化儀器使用，以杭州奧盛Auto-Pure32A核酸提取儀為例（如要配套其他主流自動化儀器使用，程序可向翌圣生物科技（上海）股份有限公司獲取）：1. 樣本處理
a. 待測樣本為疫苗等本身含有較高的DNA含量的樣本，可用1×PBS（pH=7.4）稀釋100倍或1,000倍后提取。
b. 待測樣本為干粉的，可用ddH2O將樣本稀釋成10 mg/mL或者100 mg/mL后使用。
c. 待測樣本為復雜背景基質的，可根據需要進行加標回收實驗，以確定合適的樣本稀釋倍數。
2. 取100 μL樣本裝于1.5 mL離心管中，加入100 μL裂解液，10 μL蛋白酶K，渦旋混勻10 sec。
【注】：樣本蛋白濃度0-100 mg/mL，蛋白酶K用量為10 μL，樣本蛋白濃度100-200 mg/mL，蛋白酶K用量為20 μL。
3. 60℃孵育20 min，即為預處理樣本，待用。
4. 按照下表向96孔深孔板中加入相應試劑（以杭州奧盛Auto-Pure32A核酸提取儀為例）：
板的名稱
位置
試劑名稱
用量/孔
樣品處理板
V1
預處理樣本
200 µL
結合液
400 µL
糖原
9 µL
Poly A鉀鹽
6 µL
漂洗板
V2
洗滌液A*
500 µL
洗滌板/磁珠板
V3
磁珠懸浮液
20 µL
洗滌液B*
500 µL
洗脫板
V6
洗脫液
50-100 µL
【注】：磁珠懸浮液使用前需在渦旋混勻儀上充分重懸或充分顛倒混勻，在一次性加樣4-5次后，建議再次混勻后再行加樣。
5. 按照提取儀的位置，正確安放上述96孔預裝板，并放置96深孔磁棒套。
6. 運行如下程序，程序結束后，將洗脫液轉移至新的離心管中，溶液可置于-20℃短期保存，-80℃長期保存。
奧盛Auto-Pure32A的提取儀器的提取程序
步驟
孔位
混合時間(min)
吸磁時間(sec)
等待時間(min)
容積(μL)
混合速度(1-10)
溫度(℃)
混合位置(0-100%)
混合幅度(1-100%)
吸磁位置(0-100%)
吸磁速度(1-10)
移磁珠
3
0.2
60
0
500
5
/
0
80
0
1
結合
1
15
90
0
600
5
/
0
80
0
1
清洗1
2
1
60
0
500
8
/
0
80
0
1
清洗2
3
1
60
4
500
8
/
0
80
0
1
洗脫
6
8
90
0
100
10
65
0
80
0
1
棄磁珠
3
0.2
0
0
500
5
/
0
80
0
1
HB220413
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