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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 10T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 41204ES10 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業 |
產品介紹
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | *（元） | 目錄價（元） |
Hieff® Quick exosome isolation kit（for Body Fluids） 體液外泌體快速抽提試劑盒 | 41204ES10 | 10 T | 1055 | 1585 |
41204ES30 | 30 T | 2155 | 3555 |
產品描述
Exosome（外泌體）是由活細胞分泌的直徑約為30-150 nm的小囊泡，具有典型的脂質雙分子層結構；存在于細胞培養上清液、血清、血漿、唾液、尿液、羊水以及其它生物體液中；Exosome攜帶有多種蛋白質、脂類、DNA和RNA等重要信息，不僅在細胞與細胞間的物質和信息傳遞中起重要作用，更有望成為多種疾病的早期診斷標志物。
本試劑盒采用*的分離技術，可以快速從體液如腦脊液、羊水、唾液、肺泡灌洗液及鼻腔盥洗液等體液中獲得大量完整的外泌體顆粒，適用于下游的細胞共培養、電鏡分析、Western Blot、熒光定量（qPCR）和高通量測序等應用。
產品組分
運輸和保存方法
室溫運輸，本試劑盒可于室溫穩定保存24個月。
注意事項
1、使用前請將外泌體抽提試劑（41204-A）充分混勻。
2、產品只針對體液樣本，不適用其它血清/血液或者是細胞培養上清中外泌體的抽提；如果需要進行細胞上清外泌體分離，請選用細胞培養上清外泌體快速抽提試劑盒。
3、如果想要進一步純化外泌體，可以使用相應抗體包被的磁珠進行親和純化。
4、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
5、本產品僅作科研用途！
操作方法
樣品預處理：
1、收集新鮮的樣品，置于冰上待用；若為凍存的樣品，可于冰箱取出后放于25℃水浴中解凍，待*融化后置于冰上待用。
2、取1 mL（單次樣品量不能低于1 mL）體液樣品轉移至離心管中，4℃，3000 × g離心10 min，棄沉淀，并將上清轉移至新的離心管中。
3、將轉移的上清，4 ℃，10,000 × g離心20 min，棄沉淀，將上清液轉移至新的離心管中。
外泌體分離：
1、向預處理后的樣品中，按照下表加入Exosome isolation solution （其他樣品量根據表中試劑用量進行等比例變換）。
Body Fluids | 41204-A 試劑用量 |
2.0 mL | 0.5 mL |
4.0 mL | 1.0 mL |
2、蓋緊離心管蓋，渦旋振蕩1 min，放置于4℃冰箱靜置2 h。
3、取出裝有混合液的離心管，4℃，10,000×g離心60 min，棄上清（盡可能吸凈上清液），收集富含外泌體的沉淀。
4、吸取一定量體積的1×PBS溶液均勻吹打離心沉淀物，待其充分懸浮于PBS后，將懸液轉移至新的1.5 mL離心管中。
【注】加入PBS的量，建議根據初始樣本的體積決定，初始樣本體積：1×PBS體積=10:1。
5、將含有重懸液的1.5 mL離心管于4℃，12,000×g離心2 min，棄沉淀，保留上清液，該上清液即富含外泌體顆粒的溶液。
【注】此時如果依然可以看到明顯的沉淀，建議重復步驟5，多次離心至無明顯沉淀。
6、純化后的外泌體可于4℃保存3天，-80℃ 長期保存，建議對外泌體進行分裝后保存，避免反復凍融。
外泌體純化（可選）：
鑒于體液中雜蛋白較多，如果后續需要進行細胞共培養或者高通量測序，建議進一步純化外泌體。可以使用密理博100kD的孔徑的超濾管于4℃以14,000×g離心10-30 min，內管中即為純化后的外泌體顆粒；除此之外，還可以使用抗體包被的磁珠進行親和純化。
外泌體除菌（可選）：
獲得的外泌體后期需要與細胞共培養，可以使用0.22 μm的濾器進行過濾除菌。初次嘗試時，外泌體濃度在10-100 μg/mL內做梯度摸索，選擇一個較為合適的條件。
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應用 | 貨號 | 名稱 | 規格 |
外泌體提取 | 41201ES25 | Hieff® Quick exosome isolation kit（for Cell Culture Media） | 25 mL |
41202ES30 | Hieff® Quick exosome isolation kit（for Serum/Plasma） | 20 mL | |
外泌體定量 | 20118ES60 | Lysis Buffer for WB/IP Assays | 100 mL |
20201ES76 | BCA Protein Quantification Kit | 500 T(100 mL) | |
外泌體鑒定 （Western Blot） | 41203ES05 | Exosome identification kit for Western Blot | 5 T |
36232ES10 | Precast Protein Improve Gels,,8%,10 wells | 1盒（10塊） | |
36233ES10 | Precast Protein Improve Gels,,10%,10 wells | 1盒（10塊） | |
36234ES10 | Precast Protein Improve Gels,,12%,10 wells | 1盒（10塊） | |
36235ES10 | Precast Protein Improve Gels,,15%,10 wells | 1盒（10塊） | |
20352ES76 | GoldBand 3-color High Range Protein Marker（10-245kDa） | 2×250 μL | |
外泌體標記 | 40726ES10 | DiI (DiIC18(3)) | 10 mg |
40757ES25 | DiR Iodide (DiIC18(7)) | 25 mg |
HB210915
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