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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 貨號 | 20609ES76 |
|---|---|---|---|
| 應用領域 | 生物產業 |
產品介紹
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 儲存 | 價格（元） |
Human DiI-Oxidized Low Density Lipoprotein (Human DiI-Ox-LDL) 人源紅色熒光標記氧化型低密度脂蛋白 | 20609ES76 | 500μg | 4ºC避光 | 2255.00 |
產品描述
LDL是由極低密度脂蛋白（VLDL）轉變而來，主要功能是把膽固醇運輸到全身各處細胞，運輸到肝臟合成膽酸，其可用于研究受體介導的內吞作用過程，尤其是在動脈粥樣硬化等疾病中，其血漿來源的LDL可用于研究LDL在功能和代謝中的氧化作用。
氧化的LDL（Ox-LDL）是修飾LDL中的一類。修飾的LDL除包括氧化修飾的LDL外，還包括乙酰化LDL及丙二醛（MDA）、4-羥烯酸（4-HNE）直接結合的LDL，這些未經氧化修飾而僅經一般化學修飾的LDL稱為衍化的LDL。不同于衍化的LDL，Ox-LDL 的生理學*性表現在：1）在細胞生理功能影響上，Ox-LDL可誘發細胞毒性作用，影響花生四烯酸的代謝，抑制膽固醇酯化作用等，但衍化的LDL無上述效應；2）Ox-LDL消耗LDL內源性抗氧化物質，使LDL上的維生素E含量下降，而MDA-LDL無上述效應；3）氧化修飾涉及脂質過氧化反應，LDL中的PUFAs被氧化。MDA對LDL修飾，是直接和ApoB-100結合成希夫氏堿，脂質過氧化反應輕微；4）氧化LDL在氧化程度低時，ApoB降解；在氧化程度高時，ApoB又可發生再聚合。MDA對LDL的修飾，ApoB無降解、聚合反應發生；5）Ox-LDL 產生的熒光峰波長為430nm，而MDA -LDL的熒光峰波長為460nm。Ox-LDL不經LDL受體代謝，由清道夫受體識別、結合、內吞飲入細胞并喪失正常的膽固醇代謝途徑，引起細胞內脂質沉積，泡沫樣變。
LDL氧化修飾的方式有很多種，常見的有：1）細胞介導的LDL氧化修飾，又稱為生物氧化修飾的LDL。如內皮細胞，巨噬細胞，單核細胞都具有此功能；2）過度金屬離子介導的LDL氧化修飾，如Ca2+，Fe2+等；還有其他形式的氧化修飾，包括物理方法如紫外線，或過氧化物酶催化。
本品為紅色熒光標記的氧化型人源低密度脂蛋白（Human DiI-Ox-LDL），是標記熒光探針DiI（1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'- tetramethyl-indocarbocyanine perchlorate）的Ox-LDL，可以標記血管內皮細胞和巨噬細胞，可用來鑒定并分選這些細胞，以及用來研究不同細胞系對修飾化LDL的內吞作用。我司提供的DiI-Ox-LDL，每個批次均經過牛大動脈內皮細胞和小鼠巨噬細胞的標記檢測來評估產品的標記特異性，從而保證結果的一致性。
YEASEN提供的Human DiI-Ox-LDL為無菌包裝，可以直接稀釋使用。除提供DiI-Ox-LDL，我們還提供不帶標記的Ox-LDL，Ac-LDL（乙酰化修飾）以及不經修飾的LDL等。
產品性質
濃度（Concentration） | 0.8-3.0 mg/ml |
外觀（Appearance） | 乳狀液體 |
緩沖液組分（Buffer Components） | 0.02 mM EDTA in PBS, pH 7.4 |
運輸與保存方法
冰袋運輸。
4ºC無菌避光，收到貨后可穩定保存6周。千萬不可凍存！使用時一定要無菌操作！
注意事項
1)本品的稀釋工作液極不穩定，建議即配即用；
2)長期貯存可能會有沉淀析出，屬于正常現象，低速離心2 min去除沉淀即可使用；
3)LDL與LDL受體的結合需要Ca2+和Mn2+的參與，過量EDTA的存在會抑制其結合；
4)為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
操作步驟
1)無菌條件下，將Human DiI-Ox-LDL用細胞培養基稀釋至20-40 µg/ml。
2)加入活細胞內，37℃培養3-6小時。
3)孵育結束，吸去含有Human DiI-Ox-LDL的培養基，并用無探針的培養基洗幾次。
4)根據實驗需求用熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測。
a）熒光顯微鏡觀察
采用標準的羅丹明激發：發射濾光片（或建議使用波長為：Ex/Em=549nm/565nm）；若需要請使用含3%甲醛的PBS進行固定，切勿使用甲醇或丙酮固定，因Dil易溶于有機溶劑。注：需設陽性細胞以做對照。
b）細胞分選（流式細胞術）
胰蛋白酶處理細胞或者加入EDTA制成單細胞懸液，選用合適的已標記純化細胞用作陰性和陽性對照，從而進行流式分選設門（gate）。（建議使用波長為Ex: 488/514/549nm; Em: 565nm）。
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