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參考價(jià): | 面議 |
- 11147ES50 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問(wèn)次數(shù):520更新時(shí)間:2023-03-15 09:03:55
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50 T |
---|---|---|---|
貨號(hào) | 11147ES50 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit | 11147ES50 | 50 T | 1453.00 |
Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit | 11147ES70 | 200 T | 5493.00 |
Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit | 11147ES80 | 1000 T | 21282.00 |
Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit | 11147ES92 | 10000 T | 168882.00 |
產(chǎn)品描述
Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit是以RNA為模板進(jìn)行多重定量PCR反應(yīng)的試劑盒。在實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中,逆轉(zhuǎn)錄和定量PCR在同一反應(yīng)管中進(jìn)行,簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作,降低了污染的風(fēng)險(xiǎn)。
本試劑盒利用耐熱Hifair® V Reverse Transcriptase高效合成第—鏈cDNA,并利用UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase進(jìn)行定量擴(kuò)增。本試劑盒主要包含優(yōu)化的MP Buffer,Enzymes Mix等,緩沖液中已含有Mg2+和dNTP等,并添加了有效抑制非特異性PCR擴(kuò)增的因子和提升多重qPCR反應(yīng)擴(kuò)增效率的因子,能夠在保證引物擴(kuò)增效率的同時(shí),進(jìn)行多達(dá)四重的反應(yīng)。
產(chǎn)品組分
組分編號(hào) | 組分名稱 | 產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格 | |||
|
| 11147ES50 (50 T) | 11147ES70 (200 T) | 11147ES80 (1000 T) | 11147ES92 (10000 T) |
11147-A | 2×Hifair® V MP Buffer | 500 μL | 1 mL×2 | 10 mL | 100 mL |
11147-B | Hifair® V Enzyme Mix | 50 μL | 200 μL | 1 mL | 10 mL |
11147-C | RNase Free H2O | 500 μL | 1 mL×2 | 10 mL | 100 mL |
【注】
1) 2×Hifair® V MP Buffer為Multiplex One Step RT-qPCR Probe Buffer的簡(jiǎn)寫。
2)Hifair® V Enzyme Mix主要包含有耐熱Hifair® V Reverse Transcriptase和UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase。
適用機(jī)型
需添加High Rox適用機(jī)型: ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™
需添加Low Rox 適用機(jī)型: ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 and 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex
Stratagene MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™
不需要Rox校正的儀器型號(hào):
Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™
Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s; Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000
Roche Applied Science LightCycler® 480, LightCycler® 2.0; Lightcycler® 96
Thermo Scientific PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler®; Illumina Eco qPCR
運(yùn)輸與保存方式
冰袋運(yùn)輸。-20℃保存,有效期1年。本品避免反復(fù)凍融。建議分裝保存。
注意事項(xiàng)
1. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)使用RNase free耗材。
2. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
反應(yīng)體系(以20 μL為例)
組分 | 體積(μL) | 終濃度 |
2×Hifair® V MP Buffer | 10 | 1× |
Hifair® V Enzyme Mix | 1 | - |
Primer Mix (10 μM) | 各0.4 | 0.2 μM |
Probe Mix (10 μM) | 各0.2 | 0.1 μM |
模板 RNA | Total RNA 1 pg-1 μg | - |
RNase Free H2O | to 20 μL | - |
【注】:
使用前務(wù)必充分混勻,避免劇烈震蕩產(chǎn)生過(guò)多氣泡。
a) 引物濃度:Primer Mix中包含多對(duì)引物,通常每條引物終濃度為0.2 μM,也可以根據(jù)情況在0.1-1.0 μM間進(jìn)行調(diào)整。
b) 探針濃度:Probe Mix中包含多條不同熒光信號(hào)的探針,每條探針的濃度可根據(jù)具體情況在50-300 nM間調(diào)整。
c) 模板稀釋:qPCR靈敏度*,建議將模板進(jìn)行稀釋使用,控制Ct值在20-35之間適宜。
d) 反應(yīng)體系:推薦使用20 μL或50 μL,以保證目的基因擴(kuò)增的有效性和重復(fù)性。
e) 體系配制:請(qǐng)于超凈工作臺(tái)內(nèi)配制,并使用無(wú)核酸酶殘留的槍頭、反應(yīng)管;推薦使用帶濾芯的槍頭。避免交叉污染和氣溶膠污染。
標(biāo)準(zhǔn)擴(kuò)增程序
| 反應(yīng)階段 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
1 | 逆轉(zhuǎn)錄 | 50℃a | 15 min | 1 |
2 | 預(yù)變性 | 95℃ | 30 sec | 1 |
3 | 擴(kuò)增反應(yīng) | 95℃ | 10 sec | 45 |
60℃b | 30 secc |
【注】
a) 逆轉(zhuǎn)錄:對(duì)于一些復(fù)雜模板或者高GC含量的RNA模板,可將逆轉(zhuǎn)錄溫度調(diào)整至55℃,有利于提高擴(kuò)增效率。
b) 擴(kuò)增反應(yīng):擴(kuò)增反應(yīng)溫度根據(jù)設(shè)計(jì)的引物Tm值進(jìn)行調(diào)整。
c) 熒光信號(hào)采集:不同的qPCR檢測(cè)儀器所需的熒光信號(hào)采集時(shí)間不同,請(qǐng)根據(jù)短時(shí)間限制進(jìn)行設(shè)置。
相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
Hifair® Ⅲ One Step RT-qPCR Probe Kit | 11145ES50/70 | 50/200T | 1126/4126 |
Hifair® V Reverse Transcriptase 第五代耐熱逆轉(zhuǎn)錄酶 | 11300ES92 | 10000U | 1623 |
Hifair® V Reverse Transcriptase 第五代耐熱逆轉(zhuǎn)錄酶 | 11300ES93 | 5×10000 U | 5623 |
Murine RNase Inhibitor (200 U/μL, Glycerol-free) | 10703ES10 | 10KU | 983 |
Murine RNase Inhibitor (200 U/μL, Glycerol-free) | 10703ES60 | 100KU | 8573 |
Murine RNase Inhibitor (200 U/μL, Glycerol-free) | 10703ES70 | 200KU | 16273 |
Murine RNase inhibitor (40U/μl) 鼠源RNase抑制劑 | 10603ES05 | 2KU | 216 |
Murine RNase inhibitor (40U/μl) 鼠源RNase抑制劑 | 10603ES10 | 10KU | 916 |
Murine RNase inhibitor (40U/μl) 鼠源RNase抑制劑 | 10603ES20 | 100KU | 1695 |
Murine RNase inhibitor (40U/μl) 鼠源RNase抑制劑 | 10603ES60 | 200KU | 7796 |
Uracil DNA Glycosylase (UDG), heat-labile 熱敏UDG | 10303ES60 | 100U | 683 |
Uracil DNA Glycosylase (UDG), heat-labile 熱敏UDG | 10303ES76 | 500U | 3083 |
dUTP, 100mM Solution 脫氧尿苷三磷酸溶液(100 mM) | 10128ES72 | 250μl | 253 |
dUTP, 100mM Solution 脫氧尿苷三磷酸溶液(100 mM) | 10128ES80 | 1ml | 853 |
HB200130