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PAGE Gel Quick Preparation Kit (12.5%)

免封閉PAGE凝膠快速制備試劑盒（12.5%）

產品信息

產品描述

蛋白電泳經常使用聚丙烯酰胺凝膠（PAGE凝膠）來實現蛋白分離，此類凝膠一般由濃縮膠和分離膠兩部分組成，前者起到將蛋白樣品進行濃縮的作用，后者則是根據凝膠所使用的丙烯酰胺單體和N,N-亞甲基雙丙烯酰胺（甲叉丙烯酰胺）交聯劑的濃度不同從而分離不同大小范圍的蛋白質。

本試劑盒提供了一種快速制備PAGE凝膠所需的各種試劑，用戶只需自備制膠設備即可配膠，大大簡化了制膠過程，此外，本品還具有以下特點：1）制膠速度快——少僅需2 min即可灌制多塊凝膠，無需計算所需溶液量，無需稀釋；2）彩色濃縮膠——濃縮膠呈彩色，為點樣提供大便利，所含顏色配方不影響電泳、染色及轉膜等后續應用；3）無異味——無需使用TEMED，避免惡臭氣味；4）穩定性高——試劑盒配套提供的硫酸銨催化劑溶液屬改良型APS，其穩定性和催化效能都得到大大提升。5）新增功能——無需封閉分離膠，直接添加濃縮膠（熟讀配膠步驟）。

本試劑盒所配制凝膠只能用于變性PAGE凝膠電泳，該規格可配制約125塊mini膠（以0.75 mm厚度膠計算）。

產品組分

運輸與保存方法

冰袋運輸， 4℃保存。其中F組分改良型過硫酸銨溶液如果長時間不用，需保存于-20℃，有效期12個月。

注意事項

1）建議電泳時電壓在100-120V之間，如需要加快電泳速度，可增加至150V。

2）灌膠前，務必將凝膠溶液平衡到室溫（如放置幾分鐘），可有效避免凝膠中氣泡的形成。

3）過硫酸銨溶液（改良型）的使用量僅作參考，實際用量可根據個人實驗習慣和經驗增加或減少。加入較多量的過硫酸銨可加快凝膠速度，反之亦然。PAGE凝膠的凝聚速度與溫度和過硫酸銨的用量密切相關。

4）本產品已加入適量TEMED的替代品，如需進一步加快凝膠速度，臨配膠前可按需補充適量TEMED。

5）膠的凝固與溫度有顯著的正相關性。同等條件下，溫度越高，凝固速度越快。

6）彩色濃縮膠在儲存過程中可能會產生少量沉淀，屬正常現象，請放心使用。

7）改良型過硫酸銨溶液保存于-20℃。為方便吸取使用，已開蓋使用中的過硫酸銨溶液可置于4℃保存。

使用方法：建議配膠時不要一次性配置太多塊膠，避免來不及添加上層液（推薦多2-3塊）

1 根據目的蛋白的分子量大小選擇合適的凝膠濃度【參考附表1】

2 制膠流程（以一塊0.75/ 1.0/ 1.5 mm的mini膠為例）

1）取等體積分離膠緩沖液和分離膠溶液混勻，即取兩種溶液各2.0/ 2.7/ 4.0 mL。

2）往步驟1中的混合溶液中加入35/ 45/ 70 μL的改良型過硫酸銨溶液（凝固太快可減半過硫酸銨使用量），充分混勻。

3）將步驟2中的溶液注入制膠玻璃板中。注意加入分離膠后要在2 min內將濃縮膠注入凝膠模具內，且在灌注濃縮膠時要緩慢，防止濃縮膠與分離膠混合在一起。如果個人覺得配置困難，也可改編為自行用乙醇封閉之后再進行配置濃縮膠。

4）濃縮膠的配置：取等體積濃縮膠緩沖液和濃縮膠溶液混勻，即取兩種溶液各0.5/ 0.75/ 1.0 mL，然后加入10/ 13/ 18 μL的改良型過硫酸銨溶液，充分混勻。

5）注入制膠玻璃板中，插入梳齒（插膠梳時切勿用力過猛，輕輕插入）。

6）待15 min濃縮膠凝固后，拔去梳齒即可用于電泳。注：請盡量使用新鮮配置的電泳緩沖液。

附表1. 不同濃度SDS-PAGE分離膠參考分離范圍

HB200817