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產品簡介
產品介紹
Coelenterazine e 腔腸素e
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 儲存 | 價格（元） |
Coelenterazine e 腔腸素e | 40912ES02 | 1×500μg | -20℃避光 | 1329.00 |
40912ES03 | 2×500μg | -20℃避光 | 2359.00 |
背景描述
腔腸素（Coelenterazine）是自然界中資源zui豐富的天然熒光素，是絕大多數海洋發光生物（超過75%）的光能貯存分子。腔腸素可作為許多熒光素酶的底物，比如海腎熒光素酶（Rluc），Gaussia分泌型熒光素酶（Gluc），以及包括水母發光蛋白（aequorin）和藪枝螅發光蛋白（Obelia）在內的光蛋白（Photoproteins）。其發光原理是：以腔腸素為底物的熒光素酶在有分子氧的條件下，氧化腔腸素，產生高能量的中間產物，并在此過程中發射藍色光，峰值發射波長約為450~480nm。
腔腸素作為水母發光蛋白復合物（Aequorin）的組成成分，只有與鈣離子（Ca2+）結合后，才能被氧化生成高能量產物Coelenteramide，同時釋放出CO2和藍色熒光（~466nm）。其具有以下幾個優點：1）能檢測較大范圍的Ca2+濃度（0.1-100μM）；2）樣品無自體熒光，背景熒光較低，盡管信號較熒光鈣離子指示劑弱，但信噪比更高，因此具有較高靈敏度；3）Aequorin能夠穩定維持在細胞內，能夠進行數小時至數天Ca2+的監測。
圖1. 腔腸素作為水母發光蛋白輔助因子的Ca2+依賴反應流程
腔腸素具有能量轉移（Bioluminescence Resonance Energy Transfer，BRET）的特性：在底物腔腸素存在的情況下，熒光素酶（如Rluc）催化底物發生藍光，能量轉移到EYFP（增強的黃色熒光蛋白），發出綠光（~530nm）。通過Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白兩者間的相互關系研究蛋白-蛋白之間的相互作用。BRET的信號可通過比較綠光和藍光的量來進行測定，消減了因細胞數、細胞類型和其他實驗變量而引起的數據變量。
主要應用
1. 活體成像。
2. 報告基因檢測。
3. 檢測細胞/組織內活性氧（ROS）水平：細胞和組織內的超氧陰離子和過氧化亞硝基陰離子能夠增強腔腸素在酶非依賴性的氧化體系中自發熒光。
4. 高通量篩選。
5. 監測活細胞內鈣離子水平。
產品描述
腔腸素e系天然腔腸素衍生物，結構上比天然腔腸素多一個乙基。作為海腎熒光素酶的底物，其熒光強度是天然腔腸素的137%。腔腸素e具有zui高的體外水母發光蛋白反應性，且具有雙發射峰（405nm、465nm），從而可在pCa 5-7范圍內通過雙波長的比例測定Ca2+濃度。該法不依賴于腔腸素濃度，可提高檢測精確性。
產品性質
英文別名（English synonym） | e-CTZ; e Coelenterazine |
CAS號（CAS NO.） | 114496-02-5 |
分子式（Formula） | C28H23N2O3 |
分子量（Molecular weight） | 449.5g/mol |
溶解性（Solubility） | 溶于甲醇或者乙醇，不溶于DMSO |
外觀（Apperance） | 黃色至橘色固體 |
純度（Purity）（TLC） | ≥95% |
結構（Structure） |
|
運輸和保存方法
冰袋運輸。粉末-20℃避光干燥保存，保存在惰性氣體環境下，避免接觸空氣。
使用方法
- e工作液的配制
- e-CTZ水溶液中不穩定，建議使用前配制新鮮工作液
1. 溶解e-CTZ粉末于酸化乙醇，配制成1mg/ml儲存液；
2. 利用配好的儲存液稀釋到合適濃度的水溶液，如用于光度計分析的濃度為100μM；
3. 將儲存液于-80℃凍存。切忌凍存水溶性工作液，工作液會被氧化而明顯降低e-CTZ活性。
注意事項
1. 腔腸素e粉末使用惰性氣體（如氮氣或氬氣），在密封良好的塑料管中避光保存于-20℃，長期保存于-70℃。管內即使有少量空氣進入，也可能造成腔腸素e氧化失活，使量化分析的結果難以在不同試驗間進行比較。
2. 腔腸素e細胞通透性較差，因此對于細胞內Ca2+濃度測定的相關實驗，精確度無法保證。
3. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
附錄1. 腔腸素及其衍生物的特性
貨號 | 產品名稱 | 基本描述 | Em (nm) | RLC* | Relative Intensity | Half-rise time (ms)** |
40904 | 天然腔腸素 Coelenterazine native | 水母發光蛋白的輔助因子，高靈敏度化學發光法檢測Ca2+濃度（0.1~100µM）。常用作Rluc和Gluc等熒光素酶的報告基因檢測底物。BRET分析，以及細胞/組織樣本中的超氧陰離子和過氧化亞硝基陰離子的化學發光檢測。快速再生能力比較重要的實驗推薦使用本底物。 | 466 | 1.00 | 1 | 6-30 |
40906 | 腔腸素h Coelenterazine h | 一種水母發光蛋白復合物，其發光強度比天然腔腸素高10倍以上。適用于報告基因分析。 | 466 | 0.75 | 16 | 6-30 |
40910 | 腔腸素hcp Coelenterazine hcp | 腔腸素hcp-水母發光蛋白復合物的熒光強度比天然腔腸素復合物高190倍，且量子產量高和Ca2+反應速度快。 | 445 | 0.65 | 500 | 2-5 |
40909 | 腔腸素cp Coelenterazine cp | Coelenterazine cp 光蛋白復合物的發光強度是天然腔腸素的15倍，且具有更快的Ca2+反應性。 | 442 | 0.63 | 28 | 2-5 |
40908 | 腔腸素f Coelenterazine f | 腔腸素f-光蛋白復合物的發光強度是天然腔腸素的20倍。其具有的細胞滲透性。當需要*的檢測Ca2+靈敏度研究水母蛋白再生實驗研究中，推薦使用本底物。 | 472 | 0.80 | 20 | 6-30 |
40911 | 腔腸素n Coelenterazine n | 所有的腔腸素衍生物中熒光強度是zui弱的，且對Ca2+反應速率也明顯低于天然腔腸素。非常有用的Ca2+低靈敏檢測底物。 | 468 | 0.25 | 0.15 | 6-30 |
40912 | 腔腸素e Coelenterazine e | 具有zui高的體外水母發光蛋白反應性，且具有雙發射峰，可在pCa5-7范圍內通過雙波長的比例測定Ca2+濃度，從而提高檢測精確性。腔腸素e的熒光強度是天然腔腸素的137%。 | 405 & 465 | 0.5 | 4 | 0.15-0.3 |
40913 | 2-methyl Coelenterazine 二甲基腔腸素 | 可高效作用于ROS（如單態氧、超氧陰離子），是一種已報道的強抗氧化劑。 | / | / | / | / |
40905 | 腔腸素 400a Coelenterazine 400a | BRET研究中Rluc的*底物。在390nm和400nm之間發藍色光，對GFP受體蛋白的光發射干擾zui小。不可作為Gluc底物。 | 400 | / | / | / |
*RLC = relative luminescence capacity : Total time-integrated emission of aequorin in saturating Ca2+ relative to native aequorin = 1.0 **Half-Rise Time : The half-rise time is the time for the luminescence signal to reach 50% of the maximum after addition of 1mM Ca2+ to a standard of aequorin reconstituted with the coelenterazine analog of interest. All data are from O. Shimomura in Cell Calcium 14, 373 (1993). | ||||||
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產品貨號 | 產品名稱 | 規格 | 價格（元） |
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Coelenterazine n 腔腸素n | 40911ES72 | 1×250μg | 2359.00 |
Coelenterazine 2-methyl 二甲基腔腸素 | 40913ES50 | 1×50μg | 929.00 |
