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Chondrex膠原單克隆抗體組合
(Arthrogen-CIA® 5-Clone Cocktail Kit)
類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA)是一種自身免疫性疾病,表現(xiàn)為對(duì)稱小關(guān)節(jié)的慢性關(guān)節(jié)滑膜炎癥,而且以炎癥的持續(xù)反復(fù)發(fā)作為主要特征。RA 完整的發(fā)病機(jī)制并不明確,其病程表現(xiàn)為關(guān)節(jié)滑膜增生和血管翳形成,繼而造成關(guān)節(jié)軟骨的破壞,zui終導(dǎo)致骨、關(guān)節(jié)壞死從而致殘。
膠原抗體誘導(dǎo)型關(guān)節(jié)炎(collagen antibody induced arthritis, CAIA)是目前研究RA常采用的造模方式,該模型突出特點(diǎn)是能在幾天之內(nèi)迅速發(fā)病,關(guān)節(jié)組織中巨噬細(xì)胞和多核型白細(xì)胞浸潤(rùn),很好的體現(xiàn)了外源性抗原抗體刺激體誘導(dǎo)的嚴(yán)重關(guān)節(jié)損傷。此模型是研究類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎發(fā)病機(jī)制和治療藥物篩選的理想模型。
Chondrex公司的膠原單克隆抗體組合(Arthrogen-CIA® 5-Clone Cocktail Kit)可用于小鼠關(guān)節(jié)炎誘導(dǎo)(CAIA)研究。自 1985年Chondrex公司生產(chǎn)并銷售4-clone cocktail(Arthrogen-CIA® arthritogenic Monoclonal Antibody)kits開始,膠原抗體誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎(CAIA)方法得到廣泛使用。CAIA成模周期短,只需24-48h就可誘導(dǎo)出嚴(yán)重風(fēng)濕型關(guān)節(jié)炎。改進(jìn)升級(jí)的5-clone cocktail kit不僅延續(xù)4-clone cocktail 的建模優(yōu)勢(shì),而且提升了在各種小鼠中高效誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎的持續(xù)性、穩(wěn)定性,甚至在CAIA低應(yīng)答性的C57BL/6小鼠,以及轉(zhuǎn)基因改造或難以預(yù)測(cè)具體基因敲 除的C57BL/6 (H-2b) 或129/Sv (H-2b)小鼠中都成功建模。
產(chǎn)品信息
Kit由小鼠mAb混合物和LPS組成:
mAb混合物是抗II型膠原蛋白的5個(gè)單克隆抗體的混合物,包括clone A2-10 (IgG2a)、F10-21 (IgG2a)、D8-6 (IgG2a)、 D1-2G(IgG2b)、D2-112 (IgG2b),識(shí)別多種物種中Ⅱ型膠原蛋白的保守抗原表位。其中,Clones A2-10、D1-2G、和D2-112識(shí)別在II型膠原蛋白CB11片段(124-402)上的167個(gè)氨基酸片段LyC1 (124-290)簇集的抗原表位,Clones F10-21和D8-6識(shí)別II型膠原蛋白的CB11片段(124-402)上的83個(gè)氨基酸多肽片段LyC2 (291-374)上簇集的抗原表位。mAb來(lái)源于小鼠,溶解于PBS中,pH 7.2,濃度為10mg/ml。
LPS是內(nèi)毒素的一種,來(lái)自E. Coli 0111:B4,用于刺激免疫反應(yīng),生成動(dòng)物模型,如果不用LPS免疫,關(guān)節(jié)炎的嚴(yán)重程度會(huì)降低。
適用動(dòng)物
7-8周齡或更大的小鼠
CAIA高敏感性小鼠:DBA/1,Balb/c,B10.RIII, C.B-17,scid/scid,或129/Sv
CAIA低敏感性小鼠:C57BL/6或C57BL/6背景基因構(gòu)建小鼠
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
多種規(guī)格,滿足客戶的不同需要;
CAIA成模周期短,只需24-48h就可誘導(dǎo)出嚴(yán)重風(fēng)濕型關(guān)節(jié)炎;
對(duì)DBA/1 and Balb/c小鼠,僅用單克隆抗體混合物誘導(dǎo)即可快速建模成功;
提升了在各種小鼠中高效誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎的持續(xù)性、穩(wěn)定性,甚至在CAIA低應(yīng)答性的C57BL/6小鼠,以及轉(zhuǎn)基因改造或難以預(yù)測(cè)具體基因敲除的C57BL/6 (H-2b) 或129/Sv (H-2b)小鼠中都成功建模。
操作方法
(一)聯(lián)合使用單克隆抗體混合物和LPS來(lái)誘導(dǎo)CAIA敏感性小鼠關(guān)節(jié)炎((DBA/1, Balb/c, B10.RIII, C.B-17, scid/scid, or 129/Sv))
第0天:靜脈或腹腔注射1.5mg的5-克隆混合物
第3天:腹腔注射25-50ug的LPS
注意:在3-4天時(shí)可以觀察到關(guān)節(jié)炎由溫和至嚴(yán)重,7-10天時(shí)達(dá)到zui嚴(yán)重。
(二)聯(lián)合使用單克隆抗體混合物和LPS來(lái)誘導(dǎo)低反應(yīng)性小鼠關(guān)節(jié)炎((C57BL/6 or C57BL/6 background)
第0天:靜脈或腹腔注射5mg的5-克隆混合物
第3天:腹腔注射25-50ug的LPS
注意:在3-4天時(shí)可以觀察到關(guān)節(jié)炎由溫和至嚴(yán)重,7-10天時(shí)達(dá)到zui嚴(yán)重。可在10-14天時(shí)再次注射LPS再次刺激炎癥關(guān)節(jié)炎。
(三)利用單克隆抗體混合物誘導(dǎo)DBA/1 and Balb/c小鼠關(guān)節(jié)炎
第0天:靜脈注射6-10mg的5-克隆單克隆抗體
注意:在2-3天時(shí)可觀察到關(guān)節(jié)炎。此種方法在其他的CAIA敏感性小鼠中還沒(méi)有得到驗(yàn)證。
小鼠對(duì)單抗混合物和LPS的易感性受品系、飼養(yǎng)條件、個(gè)體差異及動(dòng)物的處理和生存環(huán)境等影響。建議SPF級(jí)條件,因?yàn)閭鹘y(tǒng)條件時(shí),細(xì)菌污染可能使動(dòng)物產(chǎn)生免疫反應(yīng),只產(chǎn)生輕微的關(guān)節(jié)炎。建議在大規(guī)模實(shí)驗(yàn)前,先用小樣本量做初步研究。研究者應(yīng)根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)需求,選用zui合適的免疫程序。
產(chǎn)品規(guī)格/價(jià)格
貨號(hào) | mAb混合物 | LPS | 報(bào)價(jià)(元) |
53010 | 10 mg(10 mg/ml x 1 ml) | 0.5 mg(0.5 mg/ml x 1 ml) | 10696 |
53040 | 40 mg(10 mg/ml x 4 ml) | 1.5 mg(0.5 mg/ml x 3 ml) | 42437 |
53100 | 100 mg(10 mg/ml x 10 ml) | 3.5 mg(0.5 mg/ml x 7 ml) | 101006 |
參考文獻(xiàn)
1)Yoshino S. et al. J. Immunol Methods 343: 49-55 (2009)
2)Terato K. et al. Autoimmunity 22: 137-147 (1995)
3)Terato K. et al. J. Immunol. 148: 2103-2108 (1992)
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