在生命科學領域，隨著科研水平和實驗手段不斷的提高，熒光染色方法以其特異性強，使用相對于放射性元素更安全，檢測越來越靈敏等特點，受到越來越多的研究人員的認可，并且在實驗室中廣泛應用，成為經常性的實驗方法。
檢測熒光方法和手段根據不同的實驗要求和目的也多種多樣，使用zui多的還是熒光顯微鏡，熒光酶標儀，流式細胞儀等。但是，無論何種儀器，無論儀器的性能如何，要得到準確的實驗結果，準確的實驗數據，zui基本的條件就是根據所使用的熒光染料正確設置激發(fā)和發(fā)射波長。
顯微鏡熒光激發(fā)塊

下面我們以熒光顯微鏡的熒光濾色鏡為例，介紹一下濾色鏡組的構造以及根據染料，如何正確選擇濾色片。
熒光激發(fā)塊是熒光顯微鏡中用來激發(fā)熒光標本和觀察熒光的核心部件，它實際是濾色片的組合，一般含有3種濾色片:
1. 激發(fā)濾色片（Exciter Filter）：選擇透過某個波段的光，來激發(fā)熒光染料。
2. 分色鏡 （Dichroic Mirror）：反射激發(fā)光，透過熒光，一般激發(fā)光波長短，而發(fā)射光波長較長。
3. 發(fā)射濾色片(Barrier Filter) ：透過發(fā)射光，也就是我們看到的“熒光”。同時阻擋各種雜散光和激發(fā)光的反射光。

根據熒光觀察的原理—熒光染料吸收特定波長的光（即激發(fā)光），躍遷到激發(fā)態(tài)，然后再釋放出特定波長的發(fā)射光（即熒光），回到基態(tài)。由此可知熒光染料所需的激發(fā)光和釋放的熒光都是特定波長的，所以需要利用各種濾色片來選擇性的透過某種特定波長的光來實現熒光觀察。否則，就會出現激發(fā)不了，激發(fā)了卻看不到或串色的現象。所以選擇合適的濾色片非常重要！
下面我們以熒光染料DAPI為例，闡述該如何選擇熒光激發(fā)塊。

根據熒光觀察的原理—熒光染料吸收特定波長的光（即激發(fā)光），躍遷到激發(fā)態(tài)，然后再釋放出特定波長的發(fā)射光（即熒光），回到基態(tài)。由此可知熒光染料所需的激發(fā)光和釋放的熒光都是特定波長的，所以需要利用各種濾色片來選擇性的透過某種特定波長的光來實現熒光觀察。否則，就會出現激發(fā)不了，激發(fā)了卻看不到或串色的現象。所以選擇合適的濾色片非常重要！
下面我們以熒光染料DAPI為例，闡述該如何選擇熒光激發(fā)塊。